基于多指標(biāo)指紋圖譜及抗氧化活性的巴西綠蜂膠研究.pdf

1、蜂膠(Propolis)是西方蜜蜂(Apis mellifera)采集植物樹脂分泌物并混入自身上顎腺、蠟腺等分泌物加工混合而成的膠狀固形物。蜂膠的化學(xué)成分復(fù)雜，是多成分、多靶點(diǎn)的復(fù)雜體系，具有抑菌、抗氧化、抗炎、免疫調(diào)節(jié)以及抗腫瘤等多種生物學(xué)活性，廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥、保健及日化等領(lǐng)域。
　　膠源植物是影響蜂膠化學(xué)成分及生物學(xué)活性的重要因素。在巴西東南部及中西部地區(qū)，來源于酒神菊屬植物（Baccharis）的巴西綠蜂膠因其獨(dú)特的化學(xué)成分

2、及強(qiáng)效的保健功效在世界蜂膠市場(chǎng)上備受追捧。大量研究表明，巴西綠蜂膠顯著的抗炎、抗腫瘤、護(hù)肝、神經(jīng)保護(hù)及調(diào)節(jié)血糖血脂等活性都與其抗氧化作用有關(guān)。而蜂膠的抗氧化活性是其多種化學(xué)成分相互作用的整合結(jié)果，這是蜂膠的優(yōu)勢(shì)，但同時(shí)也給蜂膠的質(zhì)量控制造成了極大的困難。
　　因此，本研究采用分光光度法、高效液相色譜/電噴霧-質(zhì)譜法(HPLC-ESI-MS/MS)以及離線HPLC-DPPH法，對(duì)巴西綠蜂膠的化學(xué)成分及抗氧化活性進(jìn)行了測(cè)定;建立了巴西

3、綠蜂膠的化學(xué)指紋圖譜，確定了共有成分峰，同時(shí)對(duì)特征性化學(xué)成分進(jìn)行定量測(cè)定;并篩選評(píng)價(jià)了巴西綠蜂膠的抗氧化活性成分，建立了抗氧化活性指紋圖譜。本研究對(duì)巴西綠蜂膠的質(zhì)量控制以及抗氧化活性研究具有重要意義。具體研究?jī)?nèi)容與結(jié)果如下:
　　1.首先對(duì)巴西綠蜂膠的多酚類化合物及抗氧化活性進(jìn)行了初步評(píng)價(jià)。采用分光光度法測(cè)定了22個(gè)不同批次巴西綠蜂膠中總黃酮、總酚酸的含量，同時(shí)對(duì)其DPPH自由基清除活性進(jìn)行了測(cè)定，并考察了兩者的相關(guān)性。結(jié)果表明，

4、不同批次綠蜂膠中總黃酮含量相對(duì)較低，而總酚酸含量相對(duì)較高;DPPH自由基清除活性與總酚酸含量呈現(xiàn)顯著的正相關(guān)，而與總黃酮含量無顯著的相關(guān)性。
　　2.優(yōu)化建立了不同批次巴西綠蜂膠的高效液相色譜指紋圖譜，確定了巴西綠蜂膠的共有化學(xué)成分。并進(jìn)一步采用電噴霧-質(zhì)譜法對(duì)巴西綠蜂膠的指紋圖譜進(jìn)行了定性分析，結(jié)合已有標(biāo)準(zhǔn)品及文獻(xiàn)資料初步確認(rèn)了其中14個(gè)多酚類化合物，其中4個(gè)黃酮類化合物，10個(gè)酚酸及其酯類化合物。
　　3.建立了巴西綠蜂

5、膠中9個(gè)特征性化學(xué)成分（綠原酸、咖啡酸、p-香豆酸、3，5-二咖啡?？鼘幩?、4，5-二咖啡?？鼘幩?、3，4，5-三咖啡酰奎寧酸、山奈酚、山奈素及阿替匹林C）含量檢測(cè)的反向高效液相色譜法。結(jié)果表明，阿替匹林C是巴西綠蜂膠中含量最為豐富的多酚類化合物，咖啡酰奎寧酸類化合物也是其主要的特征性成分;不同批次綠蜂膠化學(xué)組成基本相同，而含量上存在差異。
　　4.采用離線HPLC-DPPH法研究了巴西綠蜂膠的抗氧化活性成分，同時(shí)結(jié)合多變量相關(guān)性