小海馬水提物的高效液相色譜指紋圖譜及抗氧化活性研究.pdf

1、海馬是一味名貴，常用的滋補(bǔ)藥材，由于分布海域不同各地小海馬有效成分的含量也不一而足，相差較大，質(zhì)量很難控制。為保證臨床用藥的安全性，加強(qiáng)小海馬中成藥、小海馬制劑的質(zhì)量穩(wěn)定性，減小批次生產(chǎn)之間質(zhì)量的差異性，加強(qiáng)小海馬藥材質(zhì)量控制及小海馬提取物有效成分的研究尤為有意義。近年對小海馬有效成分的藥理作用研究進(jìn)展緩慢，本文從小海馬提取物的抗氧化活性成分研究著手，建立了在線分離，篩選，鑒別小海馬抗氧化活性成分的體系，節(jié)約了人力物力財(cái)力，是一種值得推

2、廣的陸源和海洋藥物活性成分篩選，鑒別的新方法。 文章對小海馬的產(chǎn)地、有效成分、小海馬的藥理作用及研究進(jìn)展；指紋圖譜建立的方法和應(yīng)用；天然產(chǎn)物中抗氧化活性成分篩選方法及研究概況進(jìn)行了詳細(xì)的綜述。重點(diǎn)闡述了高效液相指紋圖譜在質(zhì)量控制中的應(yīng)用及抗氧化活性成分研究方法的進(jìn)展。 對小海馬有效成分的提取方法的進(jìn)行了研究比較并建立了小海馬質(zhì)量控制的高效液相色譜指紋圖譜分析方法。在選定的最佳色譜條件下，小海馬水提物大部分化合物達(dá)到基線分

3、離，該方法的系統(tǒng)適應(yīng)性、精密度、重復(fù)性、穩(wěn)定性良好；對10批小海馬樣品進(jìn)行分析，建立小海馬藥材質(zhì)量控制的高效液相色譜指紋圖譜，采用Excel軟件進(jìn)行相似度計(jì)算，對小海馬進(jìn)行真?zhèn)伪鎰e和質(zhì)量評價(jià)，結(jié)果表明該方法簡捷、有效，是小海馬藥材鑒別及質(zhì)量控制的有效方法；對海馬提取物中含量最高的三個(gè)物質(zhì)進(jìn)行高分辨質(zhì)譜和紫外光譜分析，經(jīng)鑒定分別是次黃嘌呤，尿嘧啶和黃嘌呤；用同樣的提取方法和色譜條件對其它7種藥用海洋動(dòng)物進(jìn)行相同處理，通過圖譜比較可知小海馬

4、水提物的高效液相色譜指紋圖譜與其它7種海洋動(dòng)物的HPLC圖譜差異顯著，可以作為小海馬藥材質(zhì)量控制的方法之一。 采用離線及在線的方法研究了小海馬提取物中有效成分的抗氧化活性。首先在離線實(shí)驗(yàn)中，以小海馬提取物的抗氧化活性能力為考察指標(biāo)，優(yōu)化了提取溶劑，最終確定以水為提取溶劑；分別用ABTS和DPPH自由基考察小海馬水提物的與自由基清除能力之間的量效關(guān)系和小海馬水提物清除自由基的反應(yīng)動(dòng)力學(xué)，使用這兩種自由基得到的實(shí)驗(yàn)結(jié)果能夠互相印證，

5、說明此實(shí)驗(yàn)方法切實(shí)可信；在在線實(shí)驗(yàn)中，首先優(yōu)化了在線篩選的條件，在選定的最佳條件下，分別用ABTS和DPPH自由基進(jìn)行了小海馬水提物在線抗氧化實(shí)驗(yàn)，從水提物中可以發(fā)現(xiàn)有3個(gè)抗氧化能力的物質(zhì)分別為次黃嘌呤，苯丙氨酸及色氨酸，且使用兩種不同的自由基得到的結(jié)果能夠互相得到印證，證明實(shí)驗(yàn)中發(fā)展的在線分離，測定的方法真實(shí)可信，用同樣的方法處理了其它7種藥用海洋生物，分別得到了抗氧化能力大小不同的圖譜，說明該體系有很廣泛的適應(yīng)性。 通過以上