骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞對(duì)大鼠急性放射性肝損傷修復(fù)的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：探討骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（BMSCs）對(duì)大鼠急性放射性肝損傷的修復(fù)作用。方法：1.采用全骨髓貼壁培養(yǎng)法分離獲取雄性大鼠的BMSCs，經(jīng)免疫組化技術(shù)鑒定第三代細(xì)胞（P3）表型，將其作為移植細(xì)胞。2.雌性S-D大鼠12只作為研究對(duì)象，大鼠肝臟右葉均接受單次輻射20Gy，建立急性放射性肝損傷模型；3. 隨機(jī)分成干預(yù)與對(duì)照組，干預(yù)組在放療結(jié)束后4小時(shí)內(nèi)經(jīng)尾靜脈輸注1ml的BMSCs懸液，對(duì)照組在放療結(jié)束后4小時(shí)內(nèi)輸注1ml的生理鹽水。4.每周

2、觀察大鼠的一般生活狀態(tài)；4周后檢測大鼠血清中的谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）水平；電子顯微鏡下觀察肝臟組織的病理形態(tài)學(xué)變化；采用原位雜交技術(shù)檢測肝臟組織中性別決定基因Y（SrY)的存在；采用免疫組化技術(shù)檢測肝臟組織中的ɑ-平滑肌肌動(dòng)蛋白（ɑ-SMA）的陽性表達(dá)水平。結(jié)果：1.分離獲取的雄性大鼠P3代細(xì)胞表型，CD105的陽性表達(dá)率為62.2％、CD29 16.7%、CD34 8.3％、CD31 12.0%、CD44 1.2%

3、、CD45 8.5%、CD11b 1.5%，其中BMSCs相對(duì)特異的表型CD105和CD29的陽性表達(dá)率較高；2.大鼠肝右葉接受單次輻射20Gy后4周，其大鼠存活率達(dá)到91.7%（11/12）,大鼠肝臟右葉發(fā)生不同程度的損傷，主要表現(xiàn)為匯管區(qū)炎性細(xì)胞浸潤、肝血竇水腫，且干預(yù)組大鼠肝右葉的損傷程度比對(duì)照組輕；3.干預(yù)組大鼠ALT的水平（44.00±11.95U/L）高于對(duì)照組（26.00±9.63U/L），AST的水平（69.17±8.8

4、4U/L）低于對(duì)照組（108.50±20.69U/L）（P＜0.05）；4.干預(yù)組大鼠肝右葉檢測到攜帶SrY的陽性細(xì)胞，肝左葉內(nèi)未見或僅見少量陽性細(xì)胞，肝臟右葉中陽性細(xì)胞總數(shù)（49～50個(gè)）多于肝臟左葉（9～10個(gè)），有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；而對(duì)照組中未檢測到攜帶SrY的陽性細(xì)胞；5.干預(yù)組大鼠肝右葉中ɑ-SMA的平均陽性表達(dá)率（16.22%）低于對(duì)照組（24.39%），有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。結(jié)論：1.經(jīng)全骨髓貼壁培養(yǎng)法可