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文檔簡介
1、目的:比較傳統(tǒng)戊二醛法(A組)、三氯化鋁與乙醇聯(lián)合處理法(B組)、環(huán)氧化物處理法(C組)和光氧化法(D組)四種不同方法處理牛心包后力學與抗鈣化性能比較。 方法:取牛心前區(qū)完整較平整區(qū)20塊,每一塊心包配對裁取4片,隨機分組,每組20片,A組:用含0.625%戊二醛的HEPES緩沖液(0.05 M,pH 7.4),固定24 h,0.3%戊二醛的HEPES液,4℃冰箱保存?zhèn)溆?。B組:用含0.625%戊二醛的HEPES緩沖液(0.05
2、 M,pH 7.4),固定24 h,在0.1 mol/l的三氯化鋁中處理45 min,放人80%乙醇液中,放入25℃恒溫水浴箱。C組:應用4%乙二醇二縮水甘油醚溶液(pH 10.5)處理3d,保存于于50%酒精中備用。D組:高滲透壓PBS液(pH:7.6;0sm:680 mosm)中浸泡4 h,再置于含0.1%亞甲基藍的PBS液(pH:7.6:0sm:320mosm)中平衡4 h后,500 W白熾燈照射48 h。用4種方法處理后,測定組
3、織的極限抗張強度、斷裂伸長率、熱皺縮溫度,比較其力學性能;建立大鼠皮下植入模型,包埋2月后取出標本,肉眼觀察,原子吸收火焰法測4組心包試片鈣含量,每組送2個標本HE染色及鈣染色。 結果:極限抗張強度:A組(17.35±1.71MN/M2)、B組(21.27±1.53MN/M2)、C組(17.77±1.19MN/M2)、D組(11.66±0.66MN/M2):斷裂伸長率:A組(34.16±2.08%)、B組(42.37±1.48%
4、)、C組(51.60±3.18%)、D組(48.78±3.43%) (n=20);熱皺縮溫度:A組(88.86±0.58℃)、B組(86.41±0.85℃)、C組(80.43±1.02℃)、D組(73.96±0.66℃)(n=10)。鈣含量測定:A組(96.82±7.08 μg/mg)、B組(17.96±7.87μg/mg)、C組(29.59±3.18μg/mg)、D組(2.26±0.34 μg/mg)。組織學HE染色結果可以看到A組大
5、量膠原溶解變性,無細胞核存在;B組僅有輕微膠原溶解,無細胞核存在;C組與D組相似,膠原成分保留較完整,組織結構基本完整,C有少量細胞核存在,D有明顯細胞浸。不同處理牛心包VONKOSSA’S染色可以看到A組大量黑色鈣鹽沉積,鈣化明顯;B組僅有輕微黑色鈣鹽,成條索狀;C組中可見一塊狀鈣鹽沉積;D組中沒有見到明顯鈣化組織。 結論:三氯化鋁與乙醇聯(lián)合處理組的組織交聯(lián)程度與力學強度最佳,光氧化處理組與多聚環(huán)氧化物(簡稱PC)處理組的組織
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