保肝解毒顆粒對(duì)雷公藤多苷致急性肝損傷小鼠NO和TNF-α的影響.pdf

1、目的：本課題以雷公藤多苷建立小鼠急性肝損傷模型，進(jìn)一步探究保肝解毒顆粒對(duì)藥物性肝損傷的保護(hù)作用和機(jī)理、一氧化氮(NO)和腫瘤壞死因子α(TNF-α)在急性藥物性肝損傷的作用，為中醫(yī)藥防治肝損傷實(shí)驗(yàn)研究和臨床治療奠定基礎(chǔ)。 方法：清潔級(jí)昆明種小鼠120只，體重18-22g，雌雄各半，隨機(jī)分為12組，模型組a、組b；保肝解毒顆粒高劑量組a、組b；保肝解毒顆粒中劑量組a、組b；保肝解毒顆粒低劑量組a、組b；甘利欣對(duì)照組a、組b：空白對(duì)

2、照組a、組b。造模前連續(xù)5天給小鼠高、中、低劑量組分別以保肝解毒顆粒21.6g/kg，10.8g/kg，5.4g/kg灌胃，每日一次；甘利欣組以甘利欣膠囊溶于生理鹽水配置溶液，劑量為0.075g/kg，0.2ml/10g灌胃，每日一次；模型組及空白組分別以等量生理鹽水灌胃。第5次灌胃后禁食12h，將雷公藤多苷片以0.270g/kg劑量配制成混懸液，除空白組外，各組小鼠以0.2ml/10g灌胃一次造模，空白對(duì)照組給與等體積生理鹽水灌胃。造

3、模后禁食(不禁水)18h處死小鼠并取材。組a檢測(cè)血清丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶(AST)、組b血清檢測(cè)一氧化氮(NO)，制作組a病理切片觀察肝組織病理學(xué)變化，采取免疫組織化學(xué)法檢測(cè)組a肝組織腫瘤壞死因子α(TNF-α)。 結(jié)果： (1)保肝解毒顆粒對(duì)雷公藤多苷致急性肝損傷小鼠血清ALT、AST的影響雷公藤多苷模型組小鼠血清ALT、AST明顯高于空白組，有極顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)差異意義(P<0.01)。保肝解毒顆粒各劑

4、量組及甘利欣組血清ALT、AST均較模型組顯著改善，有極顯著性差異意義(P<0.01)。保肝解毒顆粒高、中劑量組與甘利欣組降低血清ALT的效果相當(dāng)，無顯著性差異意義(P>0.05)，中劑量組效果最佳，低劑量組效果次之，明顯低于甘利欣組(P<0.01)；保肝解毒顆粒高、低劑量組與甘利欣組降低血清AST的效果相當(dāng)，無顯著性差異(P>0.05)，中劑量組降低血清AST的效果明顯優(yōu)于甘利欣組(P<0.05)。 (2)保肝解毒顆粒對(duì)雷公藤

5、多苷致急性肝損傷小鼠肝組織病理學(xué)的影響空白組小鼠肝組織結(jié)構(gòu)完好，肝細(xì)胞、肝竇、血管均無異常改變模型組小鼠肝組織病理學(xué)改變明顯，肝小葉中央靜脈擴(kuò)張，匯管區(qū)大量炎性細(xì)胞浸潤，肝細(xì)胞變性壞死嚴(yán)重，肝竇區(qū)存在大量紅細(xì)胞，肝竇間隙擴(kuò)大、血管充盈。保肝解毒顆粒各劑量組及甘利欣組較模型組有明顯改善，中劑量組效果最佳，優(yōu)于高、低劑量及甘利砍組。 (3)保肝解毒顆粒對(duì)雷公藤多苷致急性肝損傷小鼠血清NO的影響雷公藤多苷模型組小鼠血清NO水平明顯降低

6、，與空白組比較均有極顯著差異意義(P<0.01)，甘利欣組與保肝解毒顆粒高、中劑量組均可顯著升高小鼠血清NO水平，與模型組比較均有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，且三者效果相當(dāng)，無顯著差異意義；低劑量組也有升高小鼠血清NO水平的作用，但與雷公藤多苷模型組相比差異無顯著意義(P>0.05)。 (4)保肝解毒顆粒對(duì)雷公藤多苷致急性肝損傷小鼠肝組織TNF-α的影響模型組小鼠肝組織TNF-α含量明顯升高，與正常對(duì)照組比較有極顯著的統(tǒng)計(jì)

7、學(xué)意義(P<0.01)。保肝解毒顆粒各劑量干預(yù)組及甘利欣組均可明顯抑制小鼠肝組織TNF-a的表達(dá)，與模型組相比有極顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異意義(P<0.01)；保肝解毒顆粒各劑量干預(yù)組與甘利欣組相比，高、低劑量與甘利欣組在抑制TNF-α方面效果相當(dāng)，無顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異意義(P>0.05)，中劑量組與甘利欣組相比差異顯著(P<0.05)。 結(jié)論:(1)雷公藤多苷能夠成功誘導(dǎo)小鼠急性肝損傷模型，其機(jī)理可能與增強(qiáng)小鼠肝組織TNF-α表達(dá)，抑制小鼠