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1、氨芐西林是一種常用的廣譜β-內(nèi)酰胺抗生素,目前主要采用化學(xué)法合成,反應(yīng)條件苛刻,需要繁瑣的保護(hù)與去保護(hù)步驟,對(duì)環(huán)境的污染較大。酶促合成方法可以顯著減少反應(yīng)步驟,反應(yīng)條件溫和,且產(chǎn)品雜質(zhì)含量低,是清潔生產(chǎn)β-內(nèi)酰胺抗生素的重要途徑之一。 論文主要探索建立了完全有機(jī)介質(zhì)中酶促合成氨芐西林的方法,研究了水-正己烷兩相體系以及酶促一鍋合成氨芐西林的新方法;擴(kuò)展了有機(jī)溶劑添加的水相介質(zhì)體系中酶促合成氨芐西林的研究?jī)?nèi)容。 論文在水相
2、介質(zhì)體系中,以D-苯甘氨酸甲酯鹽酸鹽(D-PGM·HCl)作為活性?;w,在pH調(diào)節(jié)的條件下與6-APA酶促反應(yīng)合成氨芐西林。考察了國(guó)產(chǎn)固定化青霉素?;窱PA-750的催化性能,研究了酶濃度、pH值、底物濃度與比例、添加劑等對(duì)酶促反應(yīng)的影響,最優(yōu)化的結(jié)果為65.6%的產(chǎn)率和1.41的S/H比值。 論文通過使用D-苯甘氨酸甲酯(D-PGM)代替D-PGM-HCl作為酰基供體,成功地實(shí)現(xiàn)了完全有機(jī)介質(zhì)中氨芐西林的酶促高效合成。論
3、文篩選了一系列不同極性的有機(jī)溶劑,結(jié)果表明極性較弱的溶劑有利于保持IPA的活性,其中乙酸乙酯的效果最佳。考察了底物初始濃度、底物摩爾比、酶濃度、反應(yīng)溫度和酶的含水量對(duì)純乙酸乙酯介質(zhì)中酶促合成氨芐西林的影響,在最優(yōu)化的條件下,實(shí)現(xiàn)了高濃度底物(300 mM 6-APA與600 mM D-PGM)時(shí)的高產(chǎn)率(92.9%)和高S/H值(1.50)的氨芐西林酶促合成反應(yīng)。進(jìn)一步的研究發(fā)現(xiàn)在乙酸乙酯中加入正己烷使IPA的合成和水解活性都得到了提高
4、,但是更有利于D-PGM的水解反應(yīng)。 論文研究了水-正己烷兩相體系,發(fā)現(xiàn)30/70(v/v)的水-正己烷體系能夠有效地抑制D-PGM的水解,提高6-APA和D-PGM的轉(zhuǎn)化率,而且反應(yīng)速度很快。在200 mM 6-APA和400 mM D-PGM的底物濃度條件下,25℃時(shí)只需反應(yīng)2 h,即可達(dá)到90.5%的高產(chǎn)率和2.14的高S/H值。 論文研究建立了酶促一鍋合成氨芐西林的方法。利用青霉素酰化酶能夠催化?;退鈨煞N反應(yīng)
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