IL-1在大鼠癲癎發(fā)作后海馬新生神經(jīng)元異常遷移中的作用研究.pdf

1、目的：
　　癲癎是一種致殘性腦功能障礙，以反復(fù)發(fā)作及發(fā)作的不可預(yù)知性為其主要特點(diǎn)，其發(fā)病機(jī)制目前尚不明確。已有研究表明癲癎發(fā)作后伴有明顯的炎性反應(yīng)，病損區(qū)域炎性因子顯著增高。我們前期研究發(fā)現(xiàn)嚴(yán)重癲癎發(fā)作后海馬齒狀回存在膠質(zhì)細(xì)胞激活及新生神經(jīng)元異常遷移的現(xiàn)象，這些異位神經(jīng)元表現(xiàn)出癲癎樣活動爆發(fā)，提示異位神經(jīng)元可能是癲癎反復(fù)發(fā)作的根源之一。但炎性因子是否介導(dǎo)了新生神經(jīng)元的異常遷移，國內(nèi)外尚未見相關(guān)報(bào)道。因此，本研究以炎癥級聯(lián)反應(yīng)中的核

2、心因子白介素-1β（interleukin-1β，IL-1β）為切入點(diǎn)，觀察鋰-匹魯卡品誘導(dǎo)大鼠癲癎發(fā)作后海馬齒狀回IL-1β表達(dá)的變化，同時(shí)研究IL-1β對離體培養(yǎng)神經(jīng)元遷移的影響，探討其在新生神經(jīng)元異常遷移中的作用，并為抗癲癎治療提供新方向。
　　方法：
　　1、選用鋰-匹魯卡品誘導(dǎo)大鼠癲癎發(fā)作模型，將成年雄性SD大鼠于癲癎發(fā)作后不同時(shí)間點(diǎn)處死，分離海馬齒狀回并用RT-PCR方法檢測IL-1β、白介素-1受體拮抗劑（in

3、terleukin-1receptorantagonist，IL-1ra）及其受體1亞型（interleukin-1receptor1，IL-1R1）mRNA表達(dá)的動態(tài)變化。
　　2、分別用Transwell遷移測定法和生長錐轉(zhuǎn)向測定法觀察IL-1β對離體培養(yǎng)神經(jīng)元的化學(xué)趨化及生長錐轉(zhuǎn)向的影響。
　　結(jié)果：
　　1、正常大鼠海馬齒狀回IL-1β、IL-1ra及其受體IL-1R1mRNA呈低水平表達(dá)。癲癎發(fā)作后急性期各因

4、子的表達(dá)增高，IL-1β于發(fā)作后6h達(dá)高峰，IL-1ra和IL-1R1則于發(fā)作后12h達(dá)高峰，其表達(dá)與對照組相比具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.01）；隨時(shí)間的延長表達(dá)水平逐漸回落，IL-1β和IL-1ra在發(fā)作后2w表達(dá)水平降至最低，但仍高于對照組水平，發(fā)作后4w再度增高，與對照組相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.01）。
　　2、Transwell遷移測定法發(fā)現(xiàn)IL-1β對離體培養(yǎng)的神經(jīng)元胞體有吸引作用，并且濃度在0.1ng/ml～10ng/

5、ml范圍時(shí)，其吸引作用隨著濃度的增加而增強(qiáng)；同時(shí)我們觀察到IL-1β對神經(jīng)元胞體的吸引作用可被內(nèi)源性受體拮抗劑IL-1ra抑制。生長錐轉(zhuǎn)向測定法的結(jié)果顯示，IL-1β對單個(gè)神經(jīng)元生長錐轉(zhuǎn)向有導(dǎo)向作用，與對照組相比1μg/ml的IL-1β對神經(jīng)突起及生長錐轉(zhuǎn)向的導(dǎo)向作用明顯（P<0.05）。
　　結(jié)論：
　　1、癲癎發(fā)作后急性期及慢性期海馬齒狀回IL-1β及IL-1ramRNA表達(dá)均顯著增加，提示其可能參與癲癎發(fā)作后腦損傷并在