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文檔簡介
1、目的:
膀胱癌是泌尿系最常見的惡性腫瘤之一,膀胱癌具有多中心,易復(fù)發(fā),及浸潤性生長的特點(diǎn),膀胱癌術(shù)后輔助治療抑制腫瘤復(fù)發(fā)是膀胱癌治療的重要組成部分。本實(shí)驗(yàn)主要探討吉西他濱和欖香烯單獨(dú)或聯(lián)合對人膀胱癌T-24細(xì)胞的增殖抑制作用及對細(xì)胞凋亡和周期的影響,探索兩藥聯(lián)合的最佳給藥時(shí)序。
方法:
體外培養(yǎng)T-24細(xì)胞,采用MTT法檢測不同濃度和作用時(shí)間的吉西他濱、欖香烯單獨(dú)對細(xì)胞的增殖抑制效應(yīng),繪制濃度-生長抑制率曲
2、線,計(jì)算半數(shù)抑制濃度IC50;MTT法檢測吉西他濱聯(lián)合攬香烯不同給藥時(shí)序?qū)-24細(xì)胞的增殖抑制作用;Annexin-Ⅴ FITC/PI雙標(biāo)記染色法檢測各實(shí)驗(yàn)組對細(xì)胞凋亡的影響及PI單染法檢測各組對細(xì)胞周期的影響。
結(jié)果:
欖香烯單藥對T-24細(xì)胞的增殖抑制作用呈濃度依賴性和時(shí)間依賴性,吉西他濱單藥對T-24細(xì)胞的增殖抑制作用亦呈濃度和時(shí)間依賴性,但當(dāng)吉西他濱濃度達(dá)到100ug/ml時(shí),T-24細(xì)胞對其產(chǎn)生耐藥性,增
3、加吉西他濱藥物濃度但抑制率無明顯改變;欖香烯單藥24hIC50為40.7561±1.6327ug/ml;MTT結(jié)果提示兩藥聯(lián)合時(shí)對T-24細(xì)胞的抑制作用明顯強(qiáng)于單一用藥,結(jié)果差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),且最佳給藥時(shí)序?yàn)閮烧咄瑫r(shí)給藥;Annexin-ⅤFITC/PI雙標(biāo)記染色法結(jié)果也提示兩藥同時(shí)處理T-24細(xì)胞時(shí)的凋亡率高于其他處理組(P<0.01);PI單染法結(jié)果示單藥吉西他濱、欖香烯或兩者聯(lián)合都能使S期細(xì)胞比例減少,G1期比例
4、增加(G VS Control,E VS Control,G+E VS Control,p<0.05),其中吉西他濱單藥或聯(lián)合欖香烯作用下停滯于G1期的細(xì)胞更多些,處于S期細(xì)胞更少些(G VS E,G+E VS E,p<0.05),但兩者之間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(GVSG+E,p>0.05),
結(jié)論:
吉西他濱與欖香烯聯(lián)合作用于人膀胱癌T-24細(xì)胞時(shí),欖香烯對吉西他濱起到增效、增敏的作用,對T-24的抑制增殖和誘導(dǎo)凋亡的
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