2023年全國(guó)碩士研究生考試考研英語(yǔ)一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁(yè)
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1、雙特異性磷酸酶是酪氨酸蛋白磷酸酶家族中的一個(gè)新興家族,能夠使磷酸化的酪氨酸殘基和絲/蘇氨酸殘基去磷酸化。它們?cè)谟薪z分裂、信號(hào)傳導(dǎo)、胞外刺激和細(xì)胞周期等通路中發(fā)揮重要作用。 我們從金黃色葡萄球菌基因文庫(kù)中克隆了兩條新的雙特異性磷酸酶,命名為低分子量的雙特異性磷酸酶sLMWDSP(lowmolecularweightdualspecificityphosphatase,Staphylococcusaureus)和蛋白磷酸酶sPP2C

2、(proteinphosphatase2C,Staphylococcusaureus)。sLMWDSP具有462個(gè)堿基,編碼的蛋白有154個(gè)氨基酸且具有一個(gè)雙特異性磷酸酶的催化結(jié)構(gòu)域。蛋白產(chǎn)物的分子量為18kDa,等電點(diǎn)為4.49。sPP2C具有741個(gè)堿基,編碼的蛋白有247個(gè)氨基酸且具有一個(gè)磷酸蛋白磷酸酶2C的催化結(jié)構(gòu)域。蛋白產(chǎn)物的分子量為26.1kDa,等電點(diǎn)為4.95。在E.coli.Rossetta中表達(dá)蛋白sLMWDSP、s

3、PP2C。高純度的sLMWDSP、sPP2C用親和層析的方法純化得到。 sLMWDSP和sPP2C的磷酸酶活性用對(duì)硝基苯磷酸pNPP(p-nitrophenylphosphate,pNPP)進(jìn)行檢測(cè),發(fā)現(xiàn)sLMWDSP的最適pH是6.7,最適溫度是35℃,且不依賴于金屬離子;而sPP2C的最適pH是11.0,最適溫度是37℃,且該酶的活性必須依賴二價(jià)的金屬離子,在二價(jià)金屬離子Mn2+存在下活性最高。磷酸酶的通用抑制劑崗田酸、ED

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