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1、金黃色葡萄球菌腸毒素(Staphylococcal enterotoxins,SEs)是一類由Staphylococcus aureus(S.aureus)產(chǎn)生的外毒素,屬于典型的超抗原(Superantigen,Sag),在極低的濃度下即可非特異地大量活化T細胞,從而達到增強免疫系統(tǒng)及殺傷腫瘤的效果。目前已發(fā)現(xiàn)的SEs約有20余種,包括:SEA~SEE、SEG~SEQ及TSST-1等,其中SEC又分為SEC1～SEC3三個氨基酸序列同
2、源性大于96％的亞型。SEs具有良好的抗腫瘤理論及實踐基礎(chǔ),但是單純以SAg理論開發(fā)的抗腫瘤藥物仍未上市。我國企業(yè)自主開發(fā)了以S.aureus發(fā)酵上清液為主要成分的金葡液制劑,已應用于多種腫瘤及其它疾病的輔助治療。沈陽協(xié)和集團在其金葡液制劑高聚生?中檢出微量SEC,并將SAg抗腫瘤理論應用于該產(chǎn)品。由于SEC在金葡液中含量甚微,與大量的菌體代謝產(chǎn)物及培養(yǎng)基成分共存,并且在臨床使用中,金葡液還表現(xiàn)出了一些SAg理論難以解釋的療效,故難以判
3、定SEC在金葡液抗腫瘤治療中的關(guān)鍵作用。為了獲得純SEC蛋白,研究其抗腫瘤效果,本課題選擇SEC三個亞型之一的SEC2作為研究對象,從天然產(chǎn)SEC2的S.aureus發(fā)酵上清液出發(fā),通過超濾濃縮、硫酸銨沉淀、陰離子交換層析和分子篩層析純化獲得天然SEC2(native SEC2,nSEC2)。通過這一方法得到的nSEC2純度達到90%左右,但蛋白總量較少。由于本實驗室在通過基因工程手段大量表達重組蛋白方面的技術(shù)已經(jīng)比較成熟,根據(jù)SEC2
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