金黃色葡萄球菌B型腸毒素（SEB）對肉雞的損傷作用研究.pdf

1、33日齡健康艾維因肉雞72羽，經2周適應性飼養(yǎng)后，隨機分為試驗組和對照組，每組36羽，試驗組經關節(jié)腔注射金黃色葡萄球菌B型腸毒素(SEB)50μg/ml1ml，對照組雞只同部位注射等量滅菌生理鹽水，隔離飼養(yǎng)，觀察各組雞只臨床癥狀和病理變化，并于注射后第1、3、5、7、14、21d，各組取6羽雞由貴要靜脈采血，進行WBC計數及分類計數，同時做外周血的T淋巴細胞酯酶染色；取每羽雞的各常規(guī)組織器官石蠟包埋、切片，HE染色，光鏡觀察組織病變；對

2、肝、腎組織做自由基MDA含量及SOD活性檢測；對腎、法氏囊做透射電鏡取材、處理，電鏡觀察組織變化；對腎做TUNEL細胞凋亡檢測；對腎做Bcl-2、Bax蛋白表達檢測。通過以上指標的測定，以期探明SEB進入機體后，對機體的損傷作用。 通過對外周血的WBC計數，其結果顯示，試驗組雞只在注射GEB后第1d，白細胞數量迅速上升，到第3d上升到最高后，慢慢減少，到第21d下降到和對照組同一水平。其中第1、3、7d極顯著高于對照組(p<0.

3、01)，第5、14d顯著高于對照組(p<0.05)，第21d和對照組差異不顯著。WBC分類計數結果顯示異嗜性粒細胞在第1d有所下降，但是和對照組差異不顯著，在第14d上升到最高，顯著高于對照組(p<0.05)，第21d下降和對照組差異不顯著；嗜酸性粒細胞在第1d顯著高于對照組(p<0.05)，其余時間段和對照組差異不顯著；嗜堿性粒細胞在第1d極顯著高于對照組(p<0.01)，第14d顯著高于對照組(p<0.05)，其余時間段和對照組差異

4、不顯著；淋巴細胞在第1d極顯著高于對照組(p<0.01)，其余時間段和對照組差異不顯著；單核細胞在整個試驗周期，和對照組差異不顯著。 T淋巴細胞酯酶染色結果顯示：試驗組的T淋巴細胞在注射SEB后第1d開始上升，到第7d上升到最高，然后逐漸下降，第3d和對照組差異顯著(p<0.05)，第5、7、14、21d和對照組差異極顯著(p<0.01)。 肝、腎組織中MDA含量及SOD活性檢測結果顯示：在注射SEB后肝組織MDA含量立

5、刻上升，在第1d顯著高于對照組(p<0.05)，第3d上升到最高，極顯著高于對照組(p<0.01)，第5d逐漸下降，但仍顯著高于對照組(p<0.05)，第7、14、21恢復到正常水平，和對照組差異不顯著；試驗組SOD活性在第1、5、7d顯著低于對照組(p<0.05)，第3d和對照組差異不顯著，第21d極顯著低于對照組(p<0.01)；在注射毒素SEB后腎組織MDA含量立刻上升，且在整個實驗周期內，試驗組雞只的MDA含量一直高于對照組雞只

6、水平，并在注射后第3d、7d、14d極顯著高于對照組(p<0.01)，在注射后第21d顯著高于對照組(p<0.05)；試驗組SOD活性在注射后第1d極顯著低于對照組(p<0.01)；第21d顯著低于對照組(p<0.05)；第3d、5d、7d、14d和對照組差異不顯著。腎組織TUNEL染色結果顯示：試驗組在前期(注射SEB后第1-5d)，TUNEL染色呈陽性表達；到中后期(即注射SEB后第7-21d)，腎臟組織中TUNEL染色呈陰性表達，

7、對照組均為陰性表達。 腎組織Bcl-2、Bax蛋白表達檢測結果顯示：在注射SEB后的第1、3、5d，Bax蛋白的表達較高；而Bcl-2蛋白在第5、7d的表達較高，其余時間段和對照組差別不大，均呈陰性表達。 組織切片的光鏡、電鏡觀察結果顯示：SEB主要引起腎組織的損傷，在試驗初期(即注射毒素后第1-5d)，有輕微出血現象，同時在40倍光鏡及油鏡下能看到少量細胞呈凋亡性變化；中期(即注射SEB后第7-14d)，光鏡下發(fā)現腎小

8、管上皮細胞出現壞死，核濃縮、碎裂，腎小球腫脹，充滿囊腔，近曲小管上皮細胞發(fā)生變性、廣泛性壞死，對第14d的腎臟做透射電鏡檢測，發(fā)現腎小管上皮細胞膜溶解，有的線粒體濃縮，有的線粒體腫脹，嵴斷裂，細胞器崩解，形成空泡，核染色質邊移，腎小球血管基底膜厚度增寬，足細胞足突少量融合，上皮細胞空泡樣變、壞死；后期(即注射毒素后第21d)，腎臟出血嚴重，整個腎小管上皮細胞幾乎全部壞死，組織出現壞死灶。另外，肝臟、脾臟、法氏囊均表現出不同程度的細胞壞死