金黃色葡萄球菌α-溶血素基因的克隆與表達(dá).pdf

1、α-溶血素是金黃色葡萄球菌最重要的毒力因子，它可引起多種疾病，奶牛乳房炎的主要致病因子之一就是金黃色葡萄球菌分泌的α-溶血素。奶牛乳房炎嚴(yán)重影響牛奶的品質(zhì)，患牛牛奶中體細(xì)胞數(shù)大幅增加，會(huì)降低乳蛋白、乳糖和乳脂肪的含量，使用抗生素治療，又會(huì)引起大量殘留，從而使鮮奶受到體細(xì)胞和抗生素的雙重污染，嚴(yán)重?fù)p害乳制品的質(zhì)量和風(fēng)味。奶牛乳房炎嚴(yán)重阻礙了我國畜牧業(yè)的發(fā)展，每年均給奶牛業(yè)造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失。由于治療嚴(yán)重影響牛奶的品質(zhì)，而且金黃色葡萄球菌非

2、常容易產(chǎn)生耐藥性，其引起的感染很難治愈，因此接種疫苗就成為最理想的防制措施；但金黃色葡萄球菌常規(guī)疫苗效果不理想，故研制基因工程疫苗就成為解決問題的主要途徑。本實(shí)驗(yàn)使用從奶牛乳房炎奶樣中分離到的一株金黃色葡萄球菌致病菌株，采用PCR法擴(kuò)增出編碼成熟蛋白α-溶血素基因的全序列，與pMD18-T載體相連，構(gòu)建金黃色葡萄球菌α-溶血素克隆質(zhì)粒，進(jìn)行測序。結(jié)果表明DNA同源性在99.99％以上，編碼的蛋白質(zhì)氨基酸同源性在99.98％以上，說明金黃