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文檔簡介
1、對采自美洲雁的細菌菌株的菌體形態(tài)、菌落形態(tài)、培養(yǎng)特性、溶血特性、生化特性、致病力和16s rRNA基因進行鑒定,結果符合金黃色葡萄球菌特征,與參考菌株ATCC14458株16s rRNA基因序列同源性為97%,確定為金黃色葡萄球菌TLJ株。
利用PCR擴增了金黃色葡萄球菌TLJ株β溶血素(β-HL)基因,并進行了序列分析。結果β-HL基因長度為長993bp的一段序列,與參考株的β-HL基因核苷酸同源性在98.5%~99.8
2、%之間。
構建β-HL基因與原核表達載體pGEX-6p-1重組質粒,轉化入大腸桿菌BL21(DE3)中,用IPTG誘導,表達G-β-HL(β-HL融合蛋白),進行SDS-PAGE和WesternBlot分析,分子量約63.4KDa,能與金黃色葡萄球菌陽性血清發(fā)生特異性的免疫反應。
用G-β-HL和生理鹽水免疫健康雞,四次免疫后,兩組雞同時用美洲雁源金黃色葡萄球菌TLJ株攻毒,每羽1×108cfu/ml頸部多點
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