微囊藻毒素LR對(duì)人胚胎腎細(xì)胞HEK293凋亡相關(guān)因子的影響.pdf

1、隨著工業(yè)經(jīng)濟(jì)的發(fā)展，環(huán)境問題已日益突出，其中水華越來越多地在全球暴發(fā)，藍(lán)藻的大量繁殖不僅引發(fā)了水體富營養(yǎng)化，其產(chǎn)生的次級(jí)代謝產(chǎn)物更是嚴(yán)重威脅到了人類的健康。微囊藻毒素(Microcystin，MC)就是一類由藍(lán)綠藻產(chǎn)生的廣泛存在于水華暴發(fā)水體中的藻類毒素，它具有很強(qiáng)的毒性。MC能引起細(xì)胞氧化損傷、DNA損傷、蛋白磷酸酶2A(protein phosphatase2A，PP2A)活性抑制、細(xì)胞凋亡、腫瘤發(fā)生等一系列細(xì)胞毒性效應(yīng)。目前的研究

2、發(fā)現(xiàn)，微囊藻毒素主要作用于動(dòng)物肝臟，能引起肝功能失調(diào)，肝細(xì)胞凋亡等現(xiàn)象，但隨著研究的深入，發(fā)現(xiàn)MC兼具腎臟毒性、生殖毒性、神經(jīng)毒性等。一般認(rèn)為低濃度長時(shí)間暴露于MC能誘導(dǎo)細(xì)胞腫瘤發(fā)生，而高濃度的MC能引起細(xì)胞凋亡，但是其具體機(jī)制仍未明了。因此，本研究選擇人胚胎腎細(xì)胞HEK293為研究對(duì)象，應(yīng)用流式細(xì)胞儀，ROS檢測，Ca2+檢測，免疫印跡以及免疫熒光技術(shù)，從細(xì)胞周期、細(xì)胞凋亡、線粒體氧化損傷和細(xì)胞存活相關(guān)蛋白的表達(dá)、定位等方面進(jìn)行MC-

3、LR對(duì)HEK293細(xì)胞毒性的初步研究。研究發(fā)現(xiàn)，在本實(shí)驗(yàn)的MC-LR濃度和時(shí)間作用下，HEK293的細(xì)胞周期和細(xì)胞凋亡均沒有明顯變化，但是氧化應(yīng)激水平和胞內(nèi)Ca2+水平都明顯上升，隨后下降;MC-LR能增強(qiáng)Akt的磷酸化水平;同時(shí)MC-LR能促進(jìn)Raf1蛋白的表達(dá)，并且增強(qiáng)其S259位點(diǎn)磷酸化修飾;此外MC-LR能促進(jìn)PP2A B56α轉(zhuǎn)移到線粒體，同時(shí)引起胞內(nèi)總Bcl-2 S70位點(diǎn)磷酸化水平上升;另外MC-LR引起轉(zhuǎn)錄因子c-myc