微囊藻毒素LR對人肝細(xì)胞HL7702蛋白磷酸酶2A的影響.pdf

1、隨著經(jīng)濟快速發(fā)展,水體富營養(yǎng)化問題日益突出,藻類水華頻繁爆發(fā)。藍(lán)藻水華爆發(fā)會造成大量淡水藻類毒素的釋放,由微囊藻、顫藻、魚腥藻等產(chǎn)生的微囊藻毒素(Microcystin,MC)就是其中一類毒性最大、研究最廣的毒素。MC能引起氧化損傷、DNA損傷、蛋白磷酸酶2A活性抑制、細(xì)胞凋亡、腫瘤發(fā)生等一系列毒性效應(yīng)。而在眾多的毒性效應(yīng)中,毒素與蛋白磷酸酶2A(Protein phosphatase2A,PP2A)催化亞基C共價結(jié)合并抑制酶活性是微囊

2、藻毒素毒性作用機制的重要發(fā)現(xiàn),由于PP2A的酶活性變化與MC引起的其它細(xì)胞毒性效應(yīng)密切相關(guān)因而受到越來越多的關(guān)注。MC主要作用于動物肝臟,對肝臟的典型的病理學(xué)影響包括誘導(dǎo)肝細(xì)胞腫脹、凋亡、肝功能失調(diào)、肝內(nèi)出血甚至是腫瘤的發(fā)生。因此本研究以PP2A作為研究對象,選擇人正常肝細(xì)胞HL7702進(jìn)行MC-LR的毒性效應(yīng)研究。用不同濃度的MC-LR染毒處理HL7702細(xì)胞不同時間后,檢測PP2A酶活性以及相關(guān)亞基蛋白水平及共價修飾的變化,并對PP

3、2A不同亞基的胞內(nèi)分布和結(jié)合進(jìn)行共定位檢測,發(fā)現(xiàn)MC-LR除了抑制PP2A酶活性外,還引起PP2A-C亞基Y307位點磷酸化水平增加,L309位點甲基化水平降低,PP2A-A亞基和C亞基蛋白水平升高,PP2A-B55α三聚體全酶增加,同時出現(xiàn)了細(xì)胞骨架的破壞。這些結(jié)果提示,MC-LR對PP2A的影響除了與C亞基共價結(jié)合,還改變了PP2A亞基的蛋白水平、改變了亞基的共價修飾以及全酶類型,而且PP2A活性的變化與MC-LR引起的細(xì)胞骨架的變