微囊藻毒素LR致大鼠肝細胞氧化應激對修復基因的影響.pdf

1、目的：
　　 體外培養(yǎng)大鼠肝細胞BRL，測定微囊藻毒素LR對細胞增殖、凋亡、氧化損傷的影響以及修復基因JWA、XRCC1、PARP1的變化，探討微囊藻毒素LR致大鼠肝細胞BRL氧化損傷對修復基因JWA、XRCC1、PARP1的影響。
　　 方法：
　　 1.分別以0、1、5、10、30μg/mlMC-LR染毒大鼠肝細胞BRL24h、48h和72h，用MTT法檢測細胞增殖與凋亡情況。
　　 2.分別以0、1

2、、5、10、30μg/mlMC-LR染毒大鼠肝細胞BRL48h，測定細胞內(nèi)谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-PX)、超氧化物岐化酶(T-SOD)、丙二醛(MDA)的含量及乳酸脫氫酶(LDH)的漏出率。
　　 3.分別以0、1、5、10、30μg/mlMC-LR染毒大鼠肝細胞BRL24h、48h和72h，應用實時熒光定量PCR技術測定JWA、XRCC1和PARP1基因mRNA的表達量變化。
　　 結果：
　　 1.與不加

3、毒素的對照組細胞相比，各染毒組(1、5、10、30μg/ml)MC-LR抑制BRL細胞生長，MC-LR染毒劑量越高，細胞吸光度值越低；并隨著MC-LR染毒時問延長，細胞吸光度值逐漸降低，呈劑量效應關系和時間效應關系。
　　 2.與不加毒素的對照組細胞相比，1、5、10、30μg/mlMC-LR染毒BRL細胞48h，細胞內(nèi)MDA含量有增加的趨勢，但無統(tǒng)計學差異；30μg/ml染毒組T-SOD、GSH-PX含量下降，10、30μg/

4、ml染毒組LDH漏出率增加，差異有統(tǒng)計學意義。
　　 3.與不加毒素的對照組細胞相比，30μg/ml MC-LR染毒48小時BRL細胞PARP1基因表達下降，染毒72小時BRL細胞JWA、XRCC1和PARP1基因均表達下降。
　　 結論：
　　 1.1-30μg/ml MC-LR可以抑制大鼠肝細胞BRL的增殖，呈現(xiàn)劑量效應關系和時間效應關系。
　　 2.MC-LR可引起B(yǎng)RL細胞氧化應激損傷，10、30