Nm23-H1基因調控肺癌細胞PKA信號通路及其分子機理的實驗研究.pdf

1、四川大學華西臨床醫(yī)學院研究生學位論文獨創(chuàng)性聲明秉承華西嚴謹的校風和科研作風，本人聲明所呈交的論文是我本人在導師指導下進行的研究工作及取得的研究成果。本人確信，除了文中特別加以標注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得學?；蚱渌逃龣C構的學位或證書而使用過的材料，與我同工作的同志對本研究所做的任何貢獻均已在論文中作了明確的說明并表示謝意。申請學位論文與資料若有不實之處，本人承擔一切相關責任。論文作者簽

2、名:日期:zook.Y’“四川大學華西臨床醫(yī)學院研究生學位論文版權使用授權書本人完全了解四川大學華西臨床醫(yī)學院有關保護知識產權的規(guī)定，即:研究生在攻讀學位期fRJ所完成的學位論文的知識產權歸四川大學華西醫(yī)院四川省肺癌分子重點實驗室。本人保證畢業(yè)離校后，發(fā)表論文或使用論文工作成果時署名單位為四川大學華西醫(yī)院四川省肺癌分子重點實驗室。四川大學華西臨床醫(yī)學院有權保留并向國家有關部門或機構送交論文的復印件和磁盤，允許論文被查閱和借閱。四川大學華

3、西臨床醫(yī)學院可以公布學位論文的全部或部分內容(保密內容除外)，可以采用影印、縮印或其他手段保存論文，但其他個人或單位未經四川大學華西醫(yī)院四川省肺癌分子重點實驗室和作者本人同意，不得篡改和翻印本論文。論文作者簽名指導教師簽名一臉期.歲夕移甲、S40博士學位論文研究生:李定甩導師:周清華教授瘤的發(fā)生發(fā)展起著負調控的作用。而=23111基因表達產物被證實為核普二磷酸激酶(nucleosidediphosphatekinaseNDPK)，參與高

4、能磷酸鍵的轉移和體內的GTP的生成，而GTP是腺甘酸環(huán)化酶(adenylylcyclaseAC)活化的一個必要的協(xié)同因子(essentialcofactor)，與CAMPPKA信號通路有著極為密切的關系。為了探討mn23H1基因在調控PKA信號傳導中的作用和其分子機制，本研究應用Westernblot、放射免疫沉淀法、MTT改良Boyden小室法等技術對本研究室構建并鑒定成功的人高轉移大細胞肺癌細胞株19981，轉基因肺癌細胞株1998

5、1nm23H1pLXSN和空載體轉染肺癌細胞株19981pLXSN進行研究，觀察nm23Hl基因轉染前后人高轉移大細胞肺癌細胞株19981PICA活性的變化，及相關基因表達水平的變化，以及生物學特性包括細胞增殖力和體外侵襲力的變化.本研究在國內外首次觀察到:1.19981nm23HlpLXSN肺癌細胞株PKA活性[1.90610.0341unol(min.g)]顯著高于19981[0.44110.0211unoU(min.g)]和199

6、81pLXSN[0.44310.059pmoV(min.g)]肺癌細胞株(P=0.000):而19981與19981pLXSN肺癌細胞株間PKA活性比較無顯著性差異(P=0.991)。2.1998119981pLXSN和19981nm23H1pLXSN肺癌細胞株間CREB表達水平比較無顯著性差異(P=0.774)19981mn23H1pLXSN肺癌細胞株pCREB表達量顯著高于19981和19981pLXSN肺癌細胞株(P=0.000)