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1、目的:探討nm23-h1基因?qū)谇击[癌細(xì)胞增殖、侵襲等生物學(xué)行為的影響及可能的作用機(jī)制。 方法:檢測(cè)6個(gè)口腔鱗癌細(xì)胞系中nm23-h1的表達(dá)水平;挑選nm23-h1表達(dá)量最少、報(bào)告基因質(zhì)粒轉(zhuǎn)染效率最高的細(xì)胞系,瞬時(shí)轉(zhuǎn)染pCMV-nm23-h1質(zhì)粒,檢測(cè)轉(zhuǎn)染后細(xì)胞的生物學(xué)特性:MTT法檢測(cè)細(xì)胞增殖活性、平板克隆形成實(shí)驗(yàn)檢測(cè)克隆形成能力、流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞周期、粘附實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞粘附能力、小室侵襲實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞侵襲能力;實(shí)時(shí)定量PCR檢
2、測(cè)nm23-h1功能相關(guān)基因蛋白激酶C-α的表達(dá)、激光共聚焦顯微鏡檢測(cè)PKC-α蛋白的亞細(xì)胞定位。 結(jié)果:在Tca8113、Tb、Tca8113M、TSCC、OSC-4、Tca8113/CDDP 6個(gè)口腔鱗癌細(xì)胞系中,高轉(zhuǎn)移細(xì)胞系Tb、Tca8113M 2個(gè)細(xì)胞系的nm23-h1表達(dá)量最低。Tb細(xì)胞轉(zhuǎn)染pCMV-nm23-h1質(zhì)粒,過表達(dá)外源性nm23-h1后,細(xì)胞增殖速度、克隆形成率、粘附率和侵襲能力均降低(P<0.05),過
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