nm23-H1基因轉(zhuǎn)染對人肺癌細(xì)胞中Ras-to-MAPK信號傳導(dǎo)通路影響的實驗研究.pdf

1、已有的研究證明nm23-H<,1>基因的低表達(dá)和雜合性缺失與肺癌的高轉(zhuǎn)移性和預(yù)后不良有密切關(guān)系,伴有nm23-H1基因缺失的肺癌常伴有一些腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移相關(guān)分子的表達(dá)異常.據(jù)此,周清華推測nm23-H1基因可能為轉(zhuǎn)移相關(guān)基因的上游調(diào)節(jié)基因,它對腫瘤轉(zhuǎn)移潛能的抑制作用可能是通過調(diào)控下游基因?qū)崿F(xiàn)的,通過轉(zhuǎn)染野生型nm23-H<,1>基因有可能逆轉(zhuǎn)肺癌的轉(zhuǎn)移表型.因此,周清華等在國內(nèi)外首次提出將這種nm23-H<,1>基因參與調(diào)控下游基因并共同

2、抑制或/和逆轉(zhuǎn)肺癌轉(zhuǎn)移表型的作用,稱為"肺癌轉(zhuǎn)移抑制級聯(lián)".絲裂原活化蛋白激酶MAPK(mitogen-activated protein Kinase)信號通路是真核細(xì)胞介導(dǎo)細(xì)胞外信號到細(xì)胞內(nèi)反應(yīng)的重要信號傳導(dǎo)系統(tǒng),調(diào)節(jié)著細(xì)胞的生長、分化、分裂、死亡以及細(xì)胞間功能同步化過程.細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)激酶(ERK)通路,即Ras-to-MAPK通路是MAPK系統(tǒng)主要的和經(jīng)典的通路,主要傳遞細(xì)胞絲裂原信號,參與調(diào)節(jié)細(xì)胞周期及促進(jìn)細(xì)胞增殖分化.近年來

3、發(fā)現(xiàn)MAPK在細(xì)胞惡變和腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移過程中起重要作用.為了探討nm23-H1基因在"肺癌轉(zhuǎn)移抑制級聯(lián)"中發(fā)揮作用的分子機(jī)制及其信號傳導(dǎo)通路,本研究在前期研究工作基礎(chǔ)上,以nm23-H<,1>基因缺失的人高轉(zhuǎn)移大細(xì)胞肺癌細(xì)胞株L9981及其轉(zhuǎn)染逆轉(zhuǎn)錄病毒真核表達(dá)載體PLXSN-nm23-H1-EGFP和空載體后的細(xì)胞株L9981-nm23-H1和L9981-pLXSN為研究對象,應(yīng)用Western-b1ot、免疫沉淀、MTT、Boyden