石榴花活性物質(zhì)提取分離技術(shù)研究.pdf

1、石榴花含有多酚類、黃酮類、三萜類等多種化合物，這些化合物具有諸多功效，如軟化血管、生津化食、止瀉、止癢、解毒、降溫、抗胃酸過多等，近些年來，人們又發(fā)現(xiàn)石榴花具有抗氧化、抗糖尿病和護肝等多種功效，石榴花是一種極具研究和開發(fā)價值的天然植物資源。
　　 本課題以石榴花為原料，經(jīng)干燥、粉碎、研磨，采用酶合超聲提取技術(shù)，通過響應(yīng)面優(yōu)化法確定最佳提取工藝參數(shù)，從而最大限度提取出三類活性物質(zhì)，然后經(jīng)薄層層析和紫外分光光度法測其含量，再用大孔吸

2、附樹脂將活性物質(zhì)進行分離純化，最終研究結(jié)果如下：
　　 1.以單因素試驗為基礎(chǔ)研究酶解過程中酶添加量、酶解時間、乙醇濃度、超聲頻率以及超聲時間對活性物質(zhì)提取率的影響，并利用Minitab15中文軟件響應(yīng)面分析法進行優(yōu)化，確定最佳的工藝條件為：酶添加量為0.05g，酶解時間為60min，乙醇濃度為80％，超聲頻率為36kHz，超聲時間為20min。
　　 2．采用薄層層析及紫外分光光度法測定石榴花中三類活性物質(zhì)的含量。將樣

3、品與對照品進行薄層層析分離并用紫外分光光度法測定各種條件下多酚類、黃酮類及三萜類三類化合物的吸光度，以確定最佳提取條件下各化合物的含量。通過薄層層析分離，確定了體積比為6：8：4：2的氯仿、乙酸乙酯、甲醇、甲酸為最佳展開劑；通過紫外分光光度法測定含量并結(jié)合所做正交試驗的結(jié)果，確定了在此最佳實驗條件下提取出多酚類、黃酮類及三萜類化合物的含量分別為58.6mg/g、68.1mg/g、11.0mg/g。
　　 3．通過靜態(tài)吸附試驗從十

4、二種大孔吸附樹脂中篩選出HPD-600型、AB-8型、D-101型三種吸附量大、解吸率高的大孔吸附樹脂分別對多酚類、黃酮類及三萜類三類活性物質(zhì)進行分離純化。通過單因素試驗和正交試驗研究上樣液pH、洗脫劑濃度、上樣流速、上樣濃度、洗脫劑用量等技術(shù)參數(shù)，然后采用逐級分離技術(shù)對三種活性物質(zhì)分別進行純化富集。結(jié)果表明：pH值為6.0，洗脫劑為90％乙醇溶液，上樣流速為2.0BV/h，多酚濃度為2.02mg/mL，洗脫劑用量為3.0BV，在此工藝

5、條件下可獲得最大的多酚吸附量為93.85mg/g，回收率是80.1％；pH值為6.0，洗脫劑為90％乙醇溶液，上樣流速為1.0BV/h，黃酮濃度為1.88mg/mL，洗脫劑用量為2.0BV，在此工藝條件下可獲得最大的黃酮吸附量為69.93mg/g，回收率是92.5％；pH值為6.0，洗脫劑為90％乙醇溶液，上樣流速為3.0BV/h，三萜濃度為0.8mg/mL，洗脫劑用量為3.0BV，在此工藝條件下可獲得最大的三萜吸附量為61.57mg/