石榴花活性物質(zhì)提取分離技術(shù)研究.pdf

1、石榴花含有多酚類(lèi)、黃酮類(lèi)、三萜類(lèi)等多種化合物，這些化合物具有諸多功效，如軟化血管、生津化食、止瀉、止癢、解毒、降溫、抗胃酸過(guò)多等，近些年來(lái)，人們又發(fā)現(xiàn)石榴花具有抗氧化、抗糖尿病和護(hù)肝等多種功效，石榴花是一種極具研究和開(kāi)發(fā)價(jià)值的天然植物資源。
　　 本課題以石榴花為原料，經(jīng)干燥、粉碎、研磨，采用酶合超聲提取技術(shù)，通過(guò)響應(yīng)面優(yōu)化法確定最佳提取工藝參數(shù)，從而最大限度提取出三類(lèi)活性物質(zhì)，然后經(jīng)薄層層析和紫外分光光度法測(cè)其含量，再用大孔吸

2、附樹(shù)脂將活性物質(zhì)進(jìn)行分離純化，最終研究結(jié)果如下：
　　 1.以單因素試驗(yàn)為基礎(chǔ)研究酶解過(guò)程中酶添加量、酶解時(shí)間、乙醇濃度、超聲頻率以及超聲時(shí)間對(duì)活性物質(zhì)提取率的影響，并利用Minitab15中文軟件響應(yīng)面分析法進(jìn)行優(yōu)化，確定最佳的工藝條件為：酶添加量為0.05g，酶解時(shí)間為60min，乙醇濃度為80％，超聲頻率為36kHz，超聲時(shí)間為20min。
　　 2．采用薄層層析及紫外分光光度法測(cè)定石榴花中三類(lèi)活性物質(zhì)的含量。將樣

3、品與對(duì)照品進(jìn)行薄層層析分離并用紫外分光光度法測(cè)定各種條件下多酚類(lèi)、黃酮類(lèi)及三萜類(lèi)三類(lèi)化合物的吸光度，以確定最佳提取條件下各化合物的含量。通過(guò)薄層層析分離，確定了體積比為6：8：4：2的氯仿、乙酸乙酯、甲醇、甲酸為最佳展開(kāi)劑；通過(guò)紫外分光光度法測(cè)定含量并結(jié)合所做正交試驗(yàn)的結(jié)果，確定了在此最佳實(shí)驗(yàn)條件下提取出多酚類(lèi)、黃酮類(lèi)及三萜類(lèi)化合物的含量分別為58.6mg/g、68.1mg/g、11.0mg/g。
　　 3．通過(guò)靜態(tài)吸附試驗(yàn)從十

4、二種大孔吸附樹(shù)脂中篩選出HPD-600型、AB-8型、D-101型三種吸附量大、解吸率高的大孔吸附樹(shù)脂分別對(duì)多酚類(lèi)、黃酮類(lèi)及三萜類(lèi)三類(lèi)活性物質(zhì)進(jìn)行分離純化。通過(guò)單因素試驗(yàn)和正交試驗(yàn)研究上樣液pH、洗脫劑濃度、上樣流速、上樣濃度、洗脫劑用量等技術(shù)參數(shù)，然后采用逐級(jí)分離技術(shù)對(duì)三種活性物質(zhì)分別進(jìn)行純化富集。結(jié)果表明：pH值為6.0，洗脫劑為90％乙醇溶液，上樣流速為2.0BV/h，多酚濃度為2.02mg/mL，洗脫劑用量為3.0BV，在此工藝

5、條件下可獲得最大的多酚吸附量為93.85mg/g，回收率是80.1％；pH值為6.0，洗脫劑為90％乙醇溶液，上樣流速為1.0BV/h，黃酮濃度為1.88mg/mL，洗脫劑用量為2.0BV，在此工藝條件下可獲得最大的黃酮吸附量為69.93mg/g，回收率是92.5％；pH值為6.0，洗脫劑為90％乙醇溶液，上樣流速為3.0BV/h，三萜濃度為0.8mg/mL，洗脫劑用量為3.0BV，在此工藝條件下可獲得最大的三萜吸附量為61.57mg/