安石榴林的分離純化及活性研究.pdf

1、安石榴林是石榴皮中一種重要的鞣花單寧，據(jù)報道其具有抗氧化、抗腫瘤、抑制HIV-1病毒等多種藥理活性。但是由于其在石榴皮中含量很低（約2％），分離純化難度大、成本高，導(dǎo)致其價格昂貴，進而限制了其藥理活性研究和應(yīng)用開發(fā)進程。因此，尋求合適的提取、純化方法以獲取大量、高純度的安石榴林并對其活性進行研究有著重要的意義。本研究為安石榴林在食品、藥品、保健品中的應(yīng)用提供了理論支持，也為石榴皮這一自然資源的合理利用提供了新思路。
　　 本文對

2、安石榴林的提取、純化方法進行了研究，同時探索了硫酸水解法和閃式提取法提取安石榴林的最佳工藝，并建立了H-103樹脂和中壓制備色譜聯(lián)合使用的安石榴林純化方法。此外，本文研究了安石榴林與牛血清白蛋白(BSA)的結(jié)合作用及結(jié)合機理，在此基礎(chǔ)上初步探討了安石榴林在啤酒澄清方面的應(yīng)用。最后，對安石榴林的抗氧化、清除亞硝酸鈉、抑制亞硝胺合成等活性進行了考察，為其在食品中的應(yīng)用提供了理論依據(jù)。
　　 1、優(yōu)化了安石榴林的提取工藝:①硫酸水解法

3、:硫酸濃度3％、水解溫度100℃、水解時間5h、液料比12:1，安石榴林的產(chǎn)率高達8.91％。②閃式提取法:閃提電壓為81V，閃提時間為1.83min，液料比為21.4∶1，安石榴林的產(chǎn)率達到6.64％。綜合比較發(fā)現(xiàn)，閃式提取法具有耗時短、效率高、易操作、成本低等優(yōu)點，更加適合工業(yè)化生產(chǎn)。
　　 2、確定了H-103樹脂分離安石榴林的最佳操作條件:將900ml濃度為4mg/ml、pH值為4.0的原料液以0.6BV/h的流速通過1

4、50mlH-103樹脂層，以50％的甲醇在1BV/h的流速下進行洗脫，收集5BV的洗脫液，干燥后即可得純度和產(chǎn)率分別為37.7％和83％的安石榴林粗品。
　　 3、中壓制備色譜(MPLC)純化安石榴林:流動相為5％的甲醇水溶液，流速為80ml/min，上樣量為1.0g，檢測波長為269nm和378nm。在此條件下，安石榴林的純度可達到95.89％，收率為90.04％，同時還可獲得純度為78.04％的沒食子酸副產(chǎn)品。
　　

5、 4、安石榴林和BSA的相互作用研究:與安石榴苷相比，安石榴林具備較弱的BSA絮凝能力，它們與BSA的結(jié)合是疏水鍵和氫鍵聯(lián)合作用的結(jié)果。安石榴林和安石榴苷復(fù)配后沒有表現(xiàn)出顯著的協(xié)同或拮抗絮凝BSA的作用。在啤酒澄清中，與安石榴林相比，安石榴苷表現(xiàn)出更好的清除蛋白質(zhì)的能力。
　　 5、安石榴林的活性研究:安石榴林有較好的DPPH、羥基自由基清除能力和較高的總還原力，表明其抗氧化性能很好。安石榴林還表現(xiàn)出較強的清除亞硝酸鈉和抑制亞硝