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文檔簡介
1、食用菌富含人類需要的多種營養(yǎng)成分，不僅是健康食品，也是人們研究天然產(chǎn)物的重要來源?；轿兜栗r美，目前對滑菇多糖的研究較為深入，據(jù)報道其活性主要表現(xiàn)在免疫調(diào)節(jié)、抗腫瘤、抗氧化和抗菌上，但對滑菇蛋白及其抗HIV-1的研究并未涉及，而已有研究表明抗氧化和抗HIV-1之間存在著密切的關(guān)系，因此本課題以滑菇子實體為研究對象，以抗氧化為篩選指標，圍繞其抗氧化蛋白的分離純化、生物活性進行研究。
首先用蒸餾水低溫浸提滑菇子實體干粉，再用硫
2、酸銨沉淀，透析除鹽后獲得蛋白粗提物A。后續(xù)分級分離純化依次使用DEAE-Cellulose陰離子交換層析、CM-Sepharose陽離子交換層析、Sephadex G75凝膠層析進行除雜和有效成分的富集，最終得到蛋白G1，回收率為0.078％。
蛋白G1經(jīng)過SDS-PAGE和Native-PAGE電泳分析推測其為單亞基蛋白，分子量為28.6kDa。通過Edman降解法測定N端序列為AGFVNGITLN，結(jié)合二級質(zhì)譜的數(shù)據(jù)庫
3、比對分析，推測該蛋白是一種未見報道的新型蛋白。
在抗氧化活性測定中，當G1濃度為250μg/ml時，其抑制小鼠紅細胞溶血的活性為81.7%，抑制脂質(zhì)過氧化的活性為19.4%；對自由基清除活性的測定結(jié)果顯示，G1具有較強的羥基自由基清除活性，在33.3μg/ml時達到91.7%。
在以HIV-1蛋白酶為靶標的抗HIV-1作用研究中，G1在25μg/ml的濃度下對HIV-1蛋白酶的抑制活性達到18.5%，高于正對
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