葛仙米藻紅蛋白的分離、純化和結(jié)構(gòu)及生物活性研究.pdf

1、葛仙米以其資源稀少、營養(yǎng)價(jià)值豐富，獨(dú)特的生物活性和藥理作用而引起人們廣泛地關(guān)注。葛仙米作為一種食藥同源的傳統(tǒng)食品已有幾千年的歷史，但對(duì)其主要活性成分的研究很少。近年來，僅少數(shù)人對(duì)其生理和基本的生化組成進(jìn)行了研究。為探討葛仙米中的生物活性成分，該文以野生葛仙米藻紅蛋白為研究對(duì)象，在系統(tǒng)研究葛仙米藻紅蛋白的提取、分離和純化的基礎(chǔ)上，利用生物大分子研究的最新技術(shù)和現(xiàn)代分離、分析手段，嘗試揭示葛仙米藻紅蛋白的結(jié)構(gòu)與生物活性及二者間的關(guān)系。其主要

2、結(jié)果如下： 1.葛仙米的生態(tài)條件及分布規(guī)律與生化組成研究以湖北省鶴峰縣走馬鎮(zhèn)野生葛仙米為研究對(duì)象，對(duì)其生態(tài)條件及分布規(guī)律與生化組成作了較系統(tǒng)的分析。測(cè)定了其水分、蛋白質(zhì)、脂肪、多糖、類胡蘿卜素、葉綠素、礦物元素的含量。 2.葛仙米藻紅蛋白的提取、分離、純化和鑒定以脫脂葛仙米為原料，采用鹽溶和鹽析的方法，首次從葛仙米中制備出清蛋白、球蛋白和鹽溶蛋白，并確定了適合葛仙米藻膽蛋白提取制備的最佳工藝，其最佳工藝條件為，緩沖液pH

3、值為7.3、浸提時(shí)間4.3h、鹽濃度0.21mol/L，葛仙米藻膽蛋白最大得率為7.13％。 利用DEAE-Cellulose52離子交換層析，采用步進(jìn)式洗脫模式成功地將葛仙米鹽G-25凝膠色譜，進(jìn)一步純化葛仙米藻紅蛋白，得到均一的藻紅蛋白。柱層析法、分光光度法、熒光光譜法和電泳法鑒定其為具有色譜純和電泳純的樣品。 3.葛仙米藻膽蛋白穩(wěn)定性研究研究了溫度、pH、光強(qiáng)、酒精濃度、中性鹽濃度和蔗糖濃度等因子對(duì)其穩(wěn)定性的影響。

4、結(jié)果表明，葛仙米藻膽蛋白在自然光照下，溫度為40℃以下，pH為5～8，酒精濃度小于40y，低濃度中性鹽和低濃度蔗糖溶液能保持較好地穩(wěn)定性。 4.葛仙米藻紅蛋白部分分子構(gòu)象的表征采用SDS-PAGE和常規(guī)PAGE電泳，F(xiàn)TIR、CD、AFM和DSC等分析技術(shù)，測(cè)定了葛仙米藻紅蛋白的分子量和結(jié)構(gòu)及變性溫度。SDS-PAGE結(jié)果表明，其分子量為51.808kd；FTIR和CD分析結(jié)果顯示，藻紅蛋白主要以a-螺旋結(jié)構(gòu)為主，β-折疊結(jié)構(gòu)含