線粒體ND2基因5178C-A突變異質性水平在中國普通人群原發(fā)性高血壓發(fā)生發(fā)展中的作用.pdf

1、第一部分線粒體ND2基因5178C>A突變異質性水平與原發(fā)性高血壓的關系
　　目的：目前有證據(jù)表明了線粒體ND2基因5178C>A突變(mt5178 C>A)與原發(fā)性高血壓(EH)發(fā)病的關系。但該突變與 EH的關系受異質性水平的影響，然而mt5178C>A異質性水平與EH發(fā)病的關聯(lián)尚未明確。本研究擬針對中國散發(fā)人群探討mt5178C>A異質性水平與EH的相關性。
　　方法：募集EH患者組和正常對照組，采集所有入選者的臨床資料

2、和血液樣本，采用熒光實時定量PCR法(探針法)進行mt5178C>A異質性水平分析。
　　結果：共募集EH病例組108例和正常對照組109例。mt5178C>A異質性水平在EH組(42±11％)與正常對照組(54±13%)之間的分布有顯著性差異(P<0.001)。將mt5178C>A異質性水平以中位數(shù)(44%)為界，采用兩步法的聚類分析，“高異質性組”能顯著降低EH的發(fā)病風險(OR=0.18,95%CI:0.10-0.31，P<0

3、.001)。在正常對照組中，對mt5178C>A異質性水平與血壓值進行相關性分析，異質性水平與收縮壓(r=-0.38，P<0.001)和舒張壓(r=-0.49，P<0.001)均呈現(xiàn)顯著負相關。Logistic回歸分析結果顯示：在單因素分析中，mt5178C>A異質性水平(OR:0.82,95%CI:0.77-0.87，P<0.001)是 EH的保護因素，而體重指數(shù)(OR:1.30,95%CI:1.12-1.45，P<0.001)、總膽

4、固醇(OR:2.13,95%CI:1.39-3.28，P=0.001)、甘油三酯(OR:7.62,95%CI:3.45-16.84，P<0.001)和血尿素氮(OR:1.35,95%CI:1.04-1.77，P=0.03)均是EH的危險因素；在多因素分析中，mt5178C>A異質性水平(OR:0.83,95%CI:0.78-0.89，P<0.001)仍是EH的獨立保護因素，但僅有體重指數(shù)(OR:1.23,95%CI:1.02-1.48，

5、P=0.03)、總膽固醇(OR:2.17,95%CI:1.58-2.98，P=0.02)和低密度脂蛋白(OR:0.06,95%CI:0.01-0.83，P=0.04)表現(xiàn)出獨立危險因素，并且P值處于0.05的臨界狀態(tài)。
　　結論：線粒體ND2基因5178 C>A突變異質性水平對中國普通人群原發(fā)性高血壓發(fā)病具有一定的保護作用。
　　第二部分線粒體ND2基因5178C>A突變異質性水平對線粒體功能的影響
　　目的：本研究擬

6、針對中國散發(fā)人群探討mt5178C>A異質性水平在EH發(fā)生發(fā)展中的可能機制。
　　方法：根據(jù)不同mt5178C>A異質性水平，分別從EH組和正常對照組中選出性別、年齡、體重指數(shù)和實驗室指標均匹配的低異質性水平組(mt5178C>A低攜帶組)和高異質性水平組(mt5178C>A高攜帶組)，通過抽取靜脈血構建永生化淋巴細胞系，采用RT-PCR、流式細胞檢測、細胞能量檢測和生物發(fā)光技術來研究不同異質性水平對ND2基因表達和線粒體功能的影

7、響，進而探討在EH發(fā)生發(fā)展中的作用機制。
　　結果：共選取mt5178C>A低攜帶組6例和mt5178C>A高攜帶組5例，兩組的異質性水平(34±2 vs.70±3%，P<0.001)顯著不同。除 ND2基因表達量在mt5178C>A低攜帶組與高攜帶組之間無差異(0.39±0.08 vs.0.40±0.03，P=0.93)以外；與mt5178C>A低攜帶組相比，mt5178C>A高攜帶組的淋巴細胞倍增時間(73.2±9.9 vs.

8、37.5±2.1h，P<0.001)、ROS生成量(89.12±9.22 vs.33.53±9.10，P<0.001)、細胞內(nèi) Ca2+濃度(64.32±5.92 vs.37.85±2.19，P<0.001)和細胞凋亡量(20.33±3.72 vs.10.80±2.59，P=0.002)顯著降低，而線粒體膜電位(ΔΨm)(1.62±0.52 vs.5.79±0.93，P<0.001)、基礎呼吸耗氧率(OCR)(23.74±1.20 vs

9、.37.23±2.23，P<0.001)、產(chǎn)生ATP的OCR(13.91±1.17 vs.24.56±3.18，P<0.001)、最大呼吸OCR(32.00±4.18 vs.65.58±11.23，P<0.001)、呼吸儲備OCR(8.26±1.84 vs.28.35±9.76，P=0.009)和ATP生成量(1456186.0±79046.9 vs.738920.1±32589.59，P<0.001)均顯著增加，說明mt5178C>A