4-胺基-1,8-萘酰亞胺結(jié)構(gòu)類似物作為PARP抑制劑的研究.pdf

1、聚腺苷二磷酸核糖聚合酶（poly(ADP-ribose) polymerase，PARP）在DNA損傷及修復(fù)活動(dòng)扮演著關(guān)鍵的角色，廣泛參與DNA損傷的識(shí)別和信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)過程，為癌癥治療提供了新靶點(diǎn)，推動(dòng)著抗癌藥物的研發(fā)。目前，已研發(fā)出許多選擇性和敏感性均較好的PARP抑制劑，且大部分已進(jìn)入臨床試驗(yàn)階段。4-胺基-1，8-萘酰亞胺（4-AN）作為PARP抑制劑已有報(bào)道，用作化療和放療的增敏劑，但其類似物并沒有作為PARP抑制劑的研究，我們判斷

2、4-AN結(jié)構(gòu)類似物中也具有抑制PARP的化合物。
　　研究目的:
　　本課題我們借鑒4-AN核心結(jié)構(gòu)，設(shè)計(jì)、合成出一系列具有三環(huán)結(jié)構(gòu)的1H-苯并[de]異喹啉-1,3（2H）-二酮的類似物，并對(duì)其進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定，同時(shí)評(píng)價(jià)了它們的PARP抑制活性和生物活性，篩選出具有PARP抑制性活的化合物，作為新型PARP抑制劑。
　　研究方法:
　　（1）4-胺基-1，8-萘酰亞胺類似物的設(shè)計(jì)。通過分析4-AN結(jié)構(gòu)和參考PARP

3、藥效團(tuán)，設(shè)計(jì)出一系列4-AN類似物，該合成方法簡單易行，產(chǎn)率較高。
　?。?）4-AN類似物的合成及結(jié)構(gòu)鑒定。所有化合物通過核磁、高分辨和液質(zhì)進(jìn)行鑒定。
　　（3）PARP抑制活性的檢測。通過非放射性的、高度敏感的比色酶標(biāo)方法，評(píng)價(jià)了所有化合物對(duì)PARP-1酶的抑制活性。選擇出PARP-1抑制率>50％的化合物（10μM）測定其IC50值。
　?。?）分子對(duì)接模型建立。通過計(jì)算機(jī)模擬出化合物與PARP-1酶的分子對(duì)接情

4、況。
　?。?）化合物生物活性評(píng)價(jià)。將篩選出具有PARP抑制活性的化合物，配制成不同濃度梯度，通過 MTT實(shí)驗(yàn)，得到使腫瘤細(xì)胞存活率大于80%的最高濃度。然后與不同濃度的順鉑聯(lián)合作用于腫瘤細(xì)胞，MTT獲取的數(shù)據(jù)計(jì)算出聯(lián)合指數(shù)，進(jìn)而評(píng)價(jià)藥物聯(lián)合使用的效力。
　　研究成果:
　　（1）設(shè)計(jì)合成出一系1H-苯并[de]異喹啉-1，3（2氫）-二酮類似物。
　　（2）通過體外PARP活性初步篩選，化合物3c，3d，3e

5、IC50值分別為2.39，0.51，6.08?M，化合物3d的PARP-1抑制效果最好，水溶性優(yōu)于4-AN。
　?。?）分子對(duì)接模擬表明3d中的羥基通過靜電作用與Glu988的殘基形成氫鍵，3c的具有兩個(gè)氫鍵與Glu988結(jié)合。對(duì)未來的結(jié)構(gòu)優(yōu)化起到參考作用。
　?。?）聯(lián)合用藥實(shí)驗(yàn)的細(xì)胞毒性顯示3d與順鉑具有協(xié)同效果，能夠減少順鉑的使用量。
　　研究結(jié)論:
　　化合物3d具有PARP抑制活性，其IC50值為0.5