促紅細(xì)胞生成素對(duì)哮喘小鼠的抗炎作用和氣道高反應(yīng)性影響.pdf

1、目的：研究促紅細(xì)胞生成素（erythropoietin，EPO）對(duì)哮喘小鼠的抗炎作用和氣道高反應(yīng)性的影響及可能機(jī)制。
　　方法：選擇6～8周的BALB/c雄性小鼠60只，隨機(jī)分為6組，每組各10只：A組（正常對(duì)照組）、B組（哮喘模型組）、C組（EPO低濃度組）、D組（EPO中濃度組）、E組（EPO高濃度組）、F組（地塞米松組）。B組，用新鮮配制的20μg卵清蛋白（ovalbumin,OVA）+2㎎氫氧化鋁共0.2ml于第1、8、1

2、5天腹腔注射致敏，第22天開(kāi)始予3％OVA生理鹽水溶液霧化吸入，每天1次，每次30分鐘連續(xù)7天。A組生理鹽水代替卵清蛋白進(jìn)行腹腔注射和霧化吸入。C、D、E、F組也給予OVA進(jìn)行攻擊，步驟同哮喘模型組，第8、11、15、18天分別腹腔注射低濃度（250IU/Kg）、中濃度（1000IU/Kg）、高濃度（2000IU/Kg）EPO、地塞米松（1mg/Kg），第8、15天用OVA攻擊前30min腹腔注射EPO及地塞米松。
　　OVA末次

3、攻擊后，24小時(shí)內(nèi)用組胺進(jìn)行支氣管激發(fā)試驗(yàn)。測(cè)定每組小鼠氣道阻力，觀察是否產(chǎn)生氣道高反應(yīng)性；采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA法）測(cè)定血清中IgE、IL-6、IL-10、TNF-a的變化；肺組織病理切片觀察肺組織病理形態(tài)變化。
　　結(jié)果：
　?、贇獾栏叻磻?yīng)性：哮喘模型組（B組）氣道阻力比對(duì)照組（A組）高，發(fā)生了氣道高反應(yīng)性。哮喘模型組（B組）、低、中、高濃度EPO組（C組、D組、E組）及地塞米松組（F組）在行支氣管激發(fā)試驗(yàn)后氣

4、道阻力比值比A組增高，比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；D、E、F組氣道阻力低于B組，比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），C組氣道阻力低于B組，但比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；不同濃度EPO組間比較，D、E組氣道阻力低于C組，比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；D組與E組比較，E組氣道阻力比D組降低，但比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；C組氣道阻力明顯高于F組，比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；D、E組氣道阻力高

5、于F組，但比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。
　　②免疫球蛋白E（IgE）：B、C、D、E、F組小鼠血清IgE的濃度較A組明顯增高，與A組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）；D、E、F組IgE低于B組，比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），C組IgE低于B組，但比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；不同濃度EPO組間比較，D、E組IgE低于C組，比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），D組與E組比較，E組IgE比D組降低，但比

6、較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；C組IgE高于F組，比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），D、E組IgE高于F組，但比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。
　?、郯捉樗?（IL-6）：B、C、D、E、F組小鼠血清IL-6的濃度較A組明顯增高，與A組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；D、E、F組IL-6低于B組，比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），C組IL-6低于B組，但比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；不同濃度EPO

7、組間比較，D、E組IL-6低于C組，比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），D組與E組比較，E組IL-6比D組降低，但比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；C組IL-6高于F組，比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），D、E組IL-6高于F組，但比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。
　?、馨捉樗?0（IL-10）：B、C、D、E、F組小鼠血清IL-10的濃度較A組明顯下降，與A組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）；D、E、F組IL

8、-10低于B組，比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），C組IL-10低于B組，但比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；不同濃度EPO組間比較，D、E組IL-10低于C組，比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），D組與E組比較，E組IL-10比D組降低，但比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；C組IL-10高于F組，比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），D、E組IL-10高于F組，但比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。
　　⑤腫瘤壞

9、死因子-a（TNF-a）：B、C、D、E、F組小鼠血清TNF-a的濃度較A組明顯增高，與A組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）；D、E、F組TNF-a低于B組，比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），C組TNF-a低于B組，但比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.01）；不同濃度EPO組間比較，D、E組TNF-a低于C組，比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），D組與E組比較，E組TNF-a比D組降低，但比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.01）；C組

10、TNF-a高于F組，比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），D、E組TNF-a高于F組，但比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.01）。
　　⑥肺組織病理切片中可以觀察到B組血管及氣管周圍大量炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)及水腫，基底膜明顯增厚，基底層平滑肌增生；A組氣管基底膜及周圍平滑肌少量增厚，周圍未見(jiàn)炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)；C、D、E組與B組比較隨著EPO濃度的升高，血管及氣道周圍炎癥細(xì)胞逐漸減少及基底層逐漸變薄，病變程度與濃度呈負(fù)相關(guān)；F組血管及氣道周圍可見(jiàn)少