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文檔簡介
1、熱習(xí)服是指由于熱的反復(fù)作用而使身體緩慢產(chǎn)生的有利于機(jī)體適應(yīng)熱環(huán)境、提高耐熱能力的一系列適應(yīng)性變化,或稱“高溫習(xí)服”。有大量研究表明人工干預(yù)熱習(xí)服的方法可明顯提高人的熱適應(yīng)能力或高溫耐力,但其中的確切機(jī)制尚未完全闡明,本研究主要探討采用動(dòng)物模型探討人工熱習(xí)服對大鼠紅細(xì)胞及促紅細(xì)胞生成素的影響,并探討其可能機(jī)制。
本實(shí)驗(yàn)采用大鼠人工熱習(xí)服模型,觀察人工熱習(xí)服對大鼠肝臟與腎臟促紅細(xì)胞生成素的影響。利用動(dòng)物溫度艙建立大鼠高溫負(fù)荷及人工
2、熱習(xí)服模型,分為對照組、高溫組及熱習(xí)服組,對照組與高溫組大鼠常溫條件下正常飼養(yǎng)10天,熱習(xí)服組大鼠同時(shí)進(jìn)行熱習(xí)服10天,各組大鼠每天監(jiān)測體重變化。其中,熱習(xí)服組大鼠每天稱量熱鍛煉前后體重變化。第11天時(shí)測定高溫組及熱習(xí)服組動(dòng)物標(biāo)準(zhǔn)熱負(fù)荷實(shí)驗(yàn)時(shí)的生理反應(yīng)(包括脈搏,呼吸及直腸溫度)?;謴?fù)24后從心臟左心室抽取大鼠血液,同時(shí)收集大鼠腎臟與肝臟。其中抗凝血液經(jīng)全自動(dòng)血液分析儀檢測,觀察血紅蛋白、紅細(xì)胞比容、紅細(xì)胞體積以及紅細(xì)胞計(jì)數(shù)指標(biāo)等;采用
3、酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)定量測定腎臟與肝臟組織促紅細(xì)胞生成素(EPO)含量;同時(shí)采用RT-PCR及Western blot技術(shù)檢測腎臟促紅細(xì)胞生成素mRNA及蛋白表達(dá)水平的變化。在此基礎(chǔ)上,進(jìn)一步觀察了熱習(xí)服過程中,大鼠血清、肝臟與腎臟組織中EPO變化的時(shí)程特征。
結(jié)果:動(dòng)物溫度艙內(nèi)10天人工熱習(xí)服可明顯提高大鼠的耐熱能力,表現(xiàn)為受到標(biāo)準(zhǔn)熱負(fù)荷時(shí)大鼠心率、呼吸頻率與肛溫的增加幅度與增加速率均明顯低于未進(jìn)行熱習(xí)服大鼠。血液相
4、關(guān)參數(shù)結(jié)果發(fā)現(xiàn)熱習(xí)服對大鼠外周血紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、血紅蛋白含量、平均紅細(xì)胞體積及血細(xì)胞比容均無明顯影響。腎臟與肝臟組織促紅細(xì)胞生成素水平測定(Elisa)結(jié)果顯示,熱習(xí)服后大鼠腎臟與肝臟組織中促紅細(xì)胞生成素水平均明顯升高,高溫暴露后大鼠肝臟EPO含量變化不明顯,而腎臟EPO含量明顯升高。RT-PCR檢測結(jié)果顯示,在腎臟組織,與對照組相比,熱習(xí)服大鼠與高溫組大鼠EPO的mRNA水平均顯著增高(P<0.05),而熱習(xí)服組較高溫組明顯降低(P<0.
5、05),但仍明顯高于對照組的水平;在肝臟組織,實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測結(jié)果顯示,與對照組相比,高溫組EPO的mRNA表達(dá)水平無顯著變化(P>0.05),但熱習(xí)服組EPO的mRNA表達(dá)水平顯著增強(qiáng)(P<0.05)。Western blot結(jié)果與免疫組織化學(xué)結(jié)果均顯示,與對照組相比,熱習(xí)服大鼠肝臟及腎臟組織 EPO蛋白表達(dá)均顯著增強(qiáng),高溫組大鼠腎臟組織 EPO蛋白表達(dá)亦有明顯增強(qiáng),但高溫組大鼠肝臟組織 EPO表達(dá)較對照無明顯變化。在熱習(xí)服過程
6、中,熱習(xí)服3天即可明顯增加大鼠血清、肝臟與腎臟組織中 EPO含量,熱習(xí)服1天時(shí),腎臟EPO蛋白表達(dá)即有明顯增強(qiáng),而肝臟組織EPO蛋白表達(dá)在熱習(xí)服10天時(shí)方觀察到明顯增強(qiáng)。
結(jié)論:熱習(xí)服可明顯增強(qiáng)大鼠高溫耐力,熱習(xí)服后紅細(xì)胞相關(guān)參數(shù)未發(fā)生明顯變化,提示熱習(xí)服可能增加紅細(xì)胞生成,但不影響紅細(xì)胞質(zhì)量。熱習(xí)服后大鼠腎臟組織與肝臟組織促紅細(xì)胞生成素mRNA表達(dá)與蛋白表達(dá)均明顯增強(qiáng),同時(shí)腎臟與肝臟組織中 EPO水平明顯升高,結(jié)果表明熱習(xí)服
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