促紅細(xì)胞生成素對腎間質(zhì)纖維化大鼠腎臟保護(hù)作用的研究.pdf

1、目的:研究幼年大鼠單側(cè)輸尿管梗阻模型(UUO模型)所制備的患側(cè)腎間質(zhì)纖維化中，給予重組人促紅細(xì)胞生成素(rh-EPO)干預(yù)后，α-平滑肌動(dòng)蛋白(α-SMA)、轉(zhuǎn)化生長因子-β1(TGF-β1)及血管內(nèi)皮生長(VEGF)的表達(dá)趨勢及變化情況，并探討其對大鼠腎間質(zhì)纖維化的影響及可能的作用機(jī)制。
　　 方法:采用單側(cè)輸尿管結(jié)扎造成大鼠患側(cè)腎間質(zhì)纖維化，2-3周齡SD大鼠72只，隨機(jī)分成對照組即A組（僅分離輸尿管，不結(jié)扎，腹腔注射生理鹽

2、水）、模型組即B組（造模，腹腔注射生理鹽水）、模型干預(yù)組即C組（造模，腹腔注射rh-EPO100IU/Kg,3次／周）。于術(shù)后3、7、14天各組分別處死8只大鼠，取患側(cè)腎做組織學(xué)檢查，HE、Masson染色光鏡下觀察腎組織病理學(xué)變化，用免疫組化方法檢測腎組織中α-SMA、TGF-β1、VEGF蛋白的表達(dá)及變化趨勢，所得數(shù)據(jù)采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件處理。
　　 結(jié)果:(1)病理變化:HE染色顯示:A組大鼠腎組織結(jié)構(gòu)未見明顯變

3、化。B組于術(shù)后3天出現(xiàn)腎小管輕度擴(kuò)張，間質(zhì)中少量單核細(xì)胞與淋巴細(xì)胞浸潤;7天時(shí)可見腎小管擴(kuò)張較前明顯，偶見腎小管萎縮，同時(shí)可見腎小管上皮細(xì)胞變性、水腫、甚至壞死，腎間質(zhì)炎癥細(xì)胞浸潤增多;14天上述病變繼續(xù)加重，間質(zhì)細(xì)胞及細(xì)胞外基質(zhì)成分增多，纖維化程度較明顯。與同期B組相比，C組大鼠腎小管擴(kuò)張程度、間質(zhì)中單核細(xì)胞及淋巴細(xì)胞浸潤的程度有所減輕;與同期A組相比，C組大鼠腎臟病變程度仍較高。Masson染色顯示:A組大鼠腎小管間質(zhì)內(nèi)未見明顯陽染

4、。隨著梗阻時(shí)間的延長B組大鼠腎組織膠原纖維增加，染色面積逐漸增多。與同期B組比較，C組大鼠腎小管間質(zhì)纖維化程度明顯減輕，膠原纖維陽染面積減少(P＜0.05)，但其程度仍高于同期A組(P＜0.05)。(2)免疫組化結(jié)果顯示:A組中α-SMA、TGF-β1在腎小管上皮細(xì)胞中有少量表達(dá);于B組和C組中α-SMA、TGF-β1隨著梗阻時(shí)間的延長表達(dá)水平逐漸上調(diào)，到14天表達(dá)最明顯;C組中兩種蛋白較B組同時(shí)間點(diǎn)的表達(dá)水平均明顯下調(diào)(P＜0.05)

5、，但各時(shí)間點(diǎn)表達(dá)水平仍明顯高于A組(P＜0.05);VEGF于腎小管上皮細(xì)胞及足突細(xì)胞中廣泛表達(dá)，隨著梗阻時(shí)間的延長，B組和C組中VEGF的表達(dá)均明顯下調(diào)，但C組較B組各時(shí)間點(diǎn)的表達(dá)水平有所上調(diào)，但仍低于A組(P＜0.05)。A組中三種蛋白的表達(dá)水平無明顯變化，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　 結(jié)論:研究顯示α-SMA、TGF-β1蛋白的表達(dá)上調(diào)及VEGF蛋白的表達(dá)下調(diào)在腎間質(zhì)纖維化的發(fā)展中具有重要的意義，用EPO干預(yù)后