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1、目的:提取、分離和純化野木瓜苷類物質(zhì),觀察它們對K562癌細(xì)胞增殖的影響;并探討木犀草苷抑制K562癌細(xì)胞增殖的可能機制,為野木瓜苷類物質(zhì)作為抗癌藥物的開發(fā)提供理論依據(jù)。 方法:通過振蕩提取法、硅膠柱層析、反相柱層析和HPLC制備柱對野木瓜中含有的苷類物質(zhì)進行提取、分離和純化,并用紫外光譜法和質(zhì)譜法對產(chǎn)品進行表征;以K562細(xì)胞為實驗對象,分別采用MTT法、熒光法及細(xì)胞流式法,觀察苷類物質(zhì)的抑癌作用,探討可能的抗癌機制。
2、 結(jié)果:從野木瓜苷類粗品AI中獲得三萜類皂苷和黃酮苷,分別用齊墩果酸和木犀草素標(biāo)定含量,得到三萜類皂苷的含量是52.4%,黃酮苷的含量是17.9%;AI經(jīng)過硅膠柱層析和反相柱層析,得到AI5.1,AI5.2,AI5.3和AI5.4;這4個產(chǎn)品對K562細(xì)胞的增殖都有抑制作用,其中AI5.4的抑制率最高,為43.37%(P<0.01);AI5.4經(jīng)過HPLC制備柱的進一步分離,得到10種產(chǎn)品;它們在1mg/L的濃度下對K562細(xì)胞的增殖都
3、有抑制作用,抑制率范圍從15.89%(P<0.05)到33.11%(P<0.01),其中Al5.4-2、AI5.4-6抑癌效果最好;AI5.4-6的質(zhì)譜分析顯示野木瓜YM7的特征峰,而AI5.4-2的質(zhì)譜分析顯示野木瓜YM2的特征峰和齊墩果酸的特征峰,可以斷定野木瓜AI5.4-2是木脂素苷和三萜類皂苷的混合物,AI5.4-8的質(zhì)譜分析顯示野木瓜YM10的特征峰,野木瓜YM10是AI5.4-8的主要成分;木犀草苷和木犀草素對K562細(xì)胞都
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