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文檔簡介
1、[背景與目的]梗阻性黃疸患者術(shù)后并發(fā)癥及死亡率較高,常并發(fā)感染、出血及肝腎功能不全等,提示梗阻性黃疸可能是一種全身性疾病,可以繼發(fā)全身多系統(tǒng)、多臟器形態(tài)和功能的改變。我們之前研究發(fā)現(xiàn),梗阻性黃疸大鼠并發(fā)內(nèi)毒素血癥、免疫功能下降以及肝功能受損,膽汁內(nèi)引流術(shù)可以逆轉(zhuǎn)這種改變,而外引流卻不能。肺臟作為全身炎癥反應(yīng)(SIRS)的重要靶臟器,肺損傷一直是國內(nèi)外研究的熱點(diǎn),但對于梗阻性黃疸是否引起肺損傷研究尚少。本研究旨在探討梗阻性黃疸是否引起肺損
2、傷以及膽汁引流方法對肺損傷的作用。
[材料與方法]采用成年SD雄性大鼠63只,隨機(jī)分為四組,分別建立梗阻性黃疸(OJ,n=14)、膽汁內(nèi)引流術(shù)(ID,n=18)、膽汁外引流術(shù)(ED,n=17)及假手術(shù)(SH,n=14)模型。梗阻性黃疸模型:膽管結(jié)扎并切斷,飼養(yǎng)7天后取標(biāo)本。膽汁內(nèi)引流術(shù)模型:第一次手術(shù)建立梗阻性黃疸模型,飼養(yǎng)7天后行第二次手術(shù),在擴(kuò)張的總膽管和十二指腸間植入支架引流管,再飼養(yǎng)7天后取標(biāo)本。膽汁外引流模型:方
3、法類似內(nèi)引流模型,將膽汁通過引流管引到頸后部皮膚外。假手術(shù)模型:分離膽管并用結(jié)扎線打松結(jié),但不結(jié)扎和切斷,飼養(yǎng)7天后取標(biāo)本。標(biāo)本采集日,分別留取腹主動(dòng)脈血及肺組織標(biāo)本。抽取腹主動(dòng)脈血0.5ml,測定動(dòng)脈血?dú)?。將左肺組織研磨,并用生理鹽水制成10%勻漿液。取右上、中肺組織經(jīng)80℃、24h烘烤,計(jì)算肺濕干比。將右下肺組織固定,做病理學(xué)檢查。采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測肺組織勻漿腫瘤壞死因子(TNF-α)含量,用生化法測定肺
4、組織勻漿髓過氧化物酶(MPO)水平,并通過SP免疫組化法測定肺組織Toll樣受體4(TLR4)的表達(dá)。
[結(jié)果]梗阻性黃疸形成以后,大鼠肺泡間隔(20.94±2.82μm)較假手術(shù)組(8.38±1.56μm)明顯增厚(P<0.001),肺濕干比增大(5.44±0.37),PaO2下降(83.3±12.4mmHg);肺組織TLR4表達(dá)陽性面積增加(45.567±8.670)(P<0.001),平均光密度升高(0.810±0.
5、068)(P<0.001),肺組織MPO濃度升高(0.877±0.183活力單位/克濕片),而肺組織TNF-α濃度下降(223.0±98.4pg/ml)。行膽汁外引流術(shù)后,大鼠肺泡間隔變薄(18.28±2.41μm)(P=0.004),肺濕干比減低(5.43±0.82),而PaO2無改善(83.1±13.0mmHg);肺組織TLR4表達(dá)陽性面積幾乎無變化(45.574±9.524),平均光密度下降(0.728±0.085)(P=0.02
6、7),肺組織MPO濃度降低(0.789±0.133活力單位/克濕片),而肺組織TNF-α濃度明顯升高(396.2±138.0pg/ml)(P=0.005)。通過膽汁內(nèi)引流術(shù)解除黃疸后,大鼠肺泡間隔明顯變薄(9.39±1.82μm)(P<0.001),肺濕干比無明顯變化(5.51±0.56),PaO2接近假手術(shù)組水平(84.1±8.9mmHg);肺組織TLR4表達(dá)明顯受到抑制,陽性表達(dá)面積減小(37.359±12.567)(P=0.046
7、),平均光密度下降(0.652±0.112)(P<0.001),肺組織MPO濃度明顯降低(0.692±0.150活力單位/克濕片)(P=0.005),而肺組織TNF-α濃度明顯升高(391.0±177.0pg/ml)(P=0.006),但比外引流術(shù)后降低。
[結(jié)論]梗阻性黃疸可引起大鼠肺損傷,表現(xiàn)為肺組織形態(tài)學(xué)、肺功能的改變。其可能機(jī)制是內(nèi)毒素經(jīng)TLR4進(jìn)行信號轉(zhuǎn)導(dǎo),釋放一系列炎癥因子,募集中性粒細(xì)胞入肺,最終引起肺損傷。
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