慢性低氧高二氧化碳對(duì)腺苷A2A受體敲除小鼠大腦線粒體功能的影響.pdf

1、目的：
　　(1)觀察慢性低O2高CO2對(duì)小鼠線粒體功能影響。
　　(2)了解A2A受體對(duì)其是否有保護(hù)作用。
　　方法：實(shí)驗(yàn)動(dòng)物隨機(jī)分為四組:正常野生組(NC+/+)、正常敲除組（NC-/-）、實(shí)驗(yàn)野生組(EX+/+)、實(shí)驗(yàn)敲除組（EX-/-），采用雄性小鼠，各組均15只;實(shí)驗(yàn)(EX)組飼養(yǎng)于氧艙中，艙內(nèi)氧濃度為9％～11％，二氧化碳濃度為5％～6％,每天8h，每周6d，共4周，其余時(shí)間與正常組一樣，生活于正常環(huán)境。采

2、用電鏡觀察大腦中線粒體形態(tài)變化，用高效液相法(HPLC)測(cè)定大腦ATP、ADP、AMP、TAN（總腺苷酸）濃度以及EC（核能）變化;用激光共聚焦法觀察線粒體膜電位的變化，熒光分光光度計(jì)法檢測(cè)膜電位變化水平;用紫外分光光度計(jì)法檢測(cè)線粒體COXⅠ、COXⅢ的活性變化和大腦組織SOD、GSH活性的變化。
　　結(jié)果：
　　(1)電鏡中兩實(shí)驗(yàn)組(EX)與兩正常組(NC)相比，EX組線粒體空泡化、線粒體嵴消失、尼氏體明顯增多;在兩實(shí)驗(yàn)組

3、之間，EX-/-組線粒體明顯水腫但線粒體嵴仍存在，EX+/+組線粒體嵴消失、空泡化。
　　(2) HPLC分析顯示:與兩正常組(NC)相比，兩實(shí)驗(yàn)組(EX) ATP、AMP、TAN濃度有著顯著的降低(P＜0.001); EX-/-組的ATP、TAN降低程度低于EX+/+組(P＜0.05)。
　　(3)激光共聚焦法觀察顯示:與兩正常組(NC)相比，兩實(shí)驗(yàn)組(EX)小鼠大腦組織線粒體膜電位明顯受到抑制;與EX+/+組相比，EX-

4、/-組線粒體膜電位受到抑制較少。
　　(4)熒光分光光度計(jì)檢測(cè)分析顯示:與兩正常組(NC)相比，兩實(shí)驗(yàn)組(EX)中線粒體膜電位均明顯受到抑制(P＜0.001);在兩實(shí)驗(yàn)組之間，與EX+/+組相比，EX-/-組膜電位受抑制較少(P＜0.001)。
　　(5)紫外分光光度計(jì)法檢測(cè)分析顯示:與兩正常組(NC)相比，兩實(shí)驗(yàn)組(EX)中線粒體COXⅠ、COXⅢ的活性均有明顯下降(P＜0.001);在兩實(shí)驗(yàn)組間，與EX+/+組相比，EX

5、-/-組中的COXⅠ活性下降較少(P＜0.05)。
　　(6) SOD、GSH檢測(cè):與兩正常組(NC)相比，兩實(shí)驗(yàn)組(EX)大腦組織SOD、GSH的活性均有明顯下降(P＜0.001);在兩實(shí)驗(yàn)組間，與EX+/+組相比，EX-/-組大腦組織的SOD活性下降較少(P＜0.05)。
　　結(jié)論：慢性低O2高CO2條件通過(guò)抑制線粒體膜電位水平、COXⅠ和COXⅢ活性使產(chǎn)能減少，從而導(dǎo)致小鼠大腦線粒體功能障礙，在此過(guò)程中氧化應(yīng)激損傷可能