ERK和P38在慢性低氧高二氧化碳小鼠骨骼肌凋亡中的作用.pdf

1、目的：
　　 本實(shí)驗(yàn)采用慢性低氧高二氧化碳的動物模型，模擬人類COPD的病理生理特點(diǎn)。通過ELISA法檢測骨骼肌線粒體和胞漿內(nèi)細(xì)胞色素C和凋亡誘導(dǎo)因子的含量，Real-Time RCR法檢測Bcl-xl mRNA、Bak mRNA、Bad mRNA的含量，免疫組化法檢測p-ERK與p-P38蛋白表達(dá)，本實(shí)驗(yàn)闡明了慢性低氧高二氧化碳導(dǎo)致小鼠骨骼肌凋亡，可能與激活ERK和P38信號通路有關(guān)。
　　 方法：
　　 本實(shí)

2、驗(yàn)采用慢性低氧高二氧化碳的動物模型，將成年SPF級雄性C57BL/6小鼠32只隨機(jī)分成2組:正常組（NC組），造模組（HH組），每組16只。造模組小鼠置于低氧高二氧化碳艙中（O2濃度為9.0％～11.0％，CO2濃度為5.0％～6.0％），每天8小時，每周6天，共4周，其余時間與對照組在同一室內(nèi)（室溫20～23℃，相對濕度50％～70％），對照組生活在正常大氣環(huán)境中，飼養(yǎng)條件2組相同。在造模前后稱量小鼠體重;光鏡觀察骨骼肌形態(tài);電鏡觀察

3、線粒體結(jié)構(gòu);ELISA法檢測骨骼肌線粒體和胞漿內(nèi)細(xì)胞色素C和凋亡誘導(dǎo)因子含量;實(shí)時定量PCR檢測Bcl-xl mRNA、Bak mRNA和Bad mRNA的含量;免疫組化法檢測p-P38與p-ERK蛋白表達(dá)。
　　 結(jié)果：
　　 (1)小鼠體重
　　 造模4周后，對照組小鼠和造模組小鼠體重都增加;與對照組相比，造模組小鼠體重降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01);
　　 (2)骨骼肌形態(tài)
　　 與

4、對照組相比，造模組小鼠骨骼肌纖維排列紊亂、斷裂，局部萎縮，脂肪沉積;
　　 (3)骨骼肌線粒體結(jié)構(gòu)
　　 與對照組相比，造模組小鼠骨骼肌線粒體膜部分破壞，嵴排列紊亂，部分消失;
　　 (4)骨骼肌細(xì)胞色素C含量
　　 與對照組相比，造模組小鼠骨骼肌線粒體內(nèi)細(xì)胞色素C含量下降，胞漿內(nèi)細(xì)胞色素C含量升高，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01);
　　 (5)骨骼肌凋亡誘導(dǎo)因子含量
　　 與對照組相

5、比，造模組小鼠骨骼肌線粒體內(nèi)凋亡誘導(dǎo)因子含量下降，胞漿內(nèi)凋亡誘導(dǎo)因子含量升高，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01);
　　 (6)骨骼肌Bcl-xl mRNA、Bak mRNA和Bad mRNA含量
　　 與對照組相比，造模組小鼠骨骼肌Bcl-xl mRNA表達(dá)減少，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）;Bak mRNA表達(dá)增加，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);Bad mRNA表達(dá)增加，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）;