EV71手足口病患兒血清神經(jīng)元特異性烯醇化酶、肌酸激酶腦型同工酶、S-100B蛋白的檢測(cè)及臨床意義.pdf

1、目的:手足口病是由多種腸道病毒引起的急性傳染病，以柯薩奇A組16型(CoxA16)及腸道病毒71型(EV71)最為多見，本病多發(fā)生于學(xué)齡前兒童，尤其是以3歲以下兒童的發(fā)病率最高。少數(shù)患兒可以出現(xiàn)腦炎、腦膜炎、腦脊髓炎、循環(huán)障礙、肺水腫等并發(fā)癥，其中重癥病例多由EV71感染所致，病情進(jìn)展非常迅速，病死率及致殘率高。因此腸道病毒71型(EV71)感染引起的重癥手足口病已經(jīng)嚴(yán)重的危及兒童生命健康。早期識(shí)別重癥病例，防止疾病進(jìn)展，提高治愈率，減

2、少病死率及致殘率也成為大家關(guān)注的熱點(diǎn)。
　　 神經(jīng)元特異性烯醇化酶(NSE)為神經(jīng)組織所特有，主要分布于中樞神經(jīng)元的胞體，軸突和樹突的胞質(zhì)中。若神經(jīng)元發(fā)生損傷，神經(jīng)元破壞、崩解，NSE釋放到腦脊液中并可透過功能受損的血-腦脊液屏障進(jìn)入血液循環(huán)，故血清NSE上升能反映神經(jīng)細(xì)胞的損傷。
　　 肌酸激酶腦型同工酶(CK-BB)是腦組織細(xì)胞內(nèi)正常成份，肌酸激酶(C K)在人體組織中含有3種同工酶，其中CKBB特異地存在于神經(jīng)元和

3、星形細(xì)胞中。若腦細(xì)胞受損，此酶即被釋出細(xì)胞進(jìn)入血清和腦脊液(CSF)中。
　　 S-100B蛋白是神經(jīng)系統(tǒng)的特異性蛋白，在腦組織中含量豐富，以高濃度存在于中樞神經(jīng)系統(tǒng)和周圍神經(jīng)系統(tǒng)的星型膠質(zhì)細(xì)胞、雪旺細(xì)胞中，當(dāng)腦細(xì)胞受損時(shí)，S-100B蛋白可釋放入腦脊液，通過血腦屏障進(jìn)入血液致血清S-100B蛋白水平升高。
　　 本研究旨在通過檢測(cè)EV71手足口病合并腦炎病例與普通病例及健康兒童血清神經(jīng)元特異性烯醇化酶(NSE)、肌酸激

4、酶腦型同工酶(CKBB)、S-100B蛋白的含量活性變化.從而探討血清NSE、CKBB、S-100B蛋白是否有助于手足口病患兒病情判斷、預(yù)后評(píng)估，及是否可作為重癥病例早期預(yù)警的實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)，防治及降低危重癥的發(fā)生。
　　 方法:取2011年3月-2011年12月我院收治的手足口病患兒為研究對(duì)象，其中重癥病例50例，普通病例50例，診斷標(biāo)準(zhǔn)參照衛(wèi)生部頒發(fā)的《手足口病診療指南(2010年版)》，對(duì)照組20例，為性別和年齡匹配，排除感染

5、及神經(jīng)源性疾病，于我院行外科手術(shù)術(shù)前兒童。標(biāo)本采集與處理:患兒于入院后24～48小時(shí)內(nèi)（病程2～5天），經(jīng)靜脈采血3～4ml，分離血清，用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)雙抗體夾心法(ELIsA)分別測(cè)定血清NSE和S-100B蛋白（μg/L）。經(jīng)全自動(dòng)生化分析儀測(cè)定CK（IU/L）。再用電泳法測(cè)出CKBB峰值的百分比計(jì)算出CKBB（IU/L）。采用SPSS17.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，經(jīng)正態(tài)性檢驗(yàn)、方差齊性檢驗(yàn)后進(jìn)行單因素方差分析。數(shù)據(jù)以x±s表示，檢驗(yàn)

6、水準(zhǔn)α=0.05，P值取雙側(cè)概率。P＜0.05時(shí)認(rèn)為有顯著性差異，否則無顯著性差異。經(jīng)單因素方差分析后，如果差異有顯著性，只說明總體來說各組均數(shù)之間有顯著性差異，再采用Dunnett'sT3法作樣本均數(shù)之間的兩兩比較。檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05，P＜0.05時(shí)認(rèn)為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 結(jié)果:
　　 1、血清NSE比較；
　　 正態(tài)性檢驗(yàn)結(jié)果:普通組的P=0.60，重癥組P=0.36，對(duì)照組P=0.65，都可認(rèn)為近似

7、正態(tài)分布。方差齊性檢驗(yàn)P＜0.01，可以認(rèn)為方差不齊。F=529.012，P＜0.01，表明組間均數(shù)差異有統(tǒng)計(jì)性。再采用Dunnett's T3法進(jìn)行均數(shù)間兩兩比較的結(jié)果:與對(duì)照組相比普通組NSE值明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01);與對(duì)照組相比重癥組NSE值明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01);與普通組相比重癥組NSE值明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01);可以認(rèn)為重癥手足口患兒、普通手足口患兒、一般兒童中血清NS

8、E水平有差別，重癥手足口病患兒高于普通手足口患兒，普通手足口患兒又高于一般兒童（見Table1）。
　　 2、血清CKBB比較；
　　 正態(tài)性檢驗(yàn)結(jié)果:普通組的P=0.44，重癥組P=0.73，對(duì)照組P=0.78，都可認(rèn)為近似正態(tài)分布。方差齊性檢驗(yàn)P＜0.01，可以認(rèn)為方差不齊。F=994.81，P＜0.01，表明組間均數(shù)差異有統(tǒng)計(jì)性。再采用Dunnett's T3法進(jìn)行均數(shù)間兩兩比較的結(jié)果:與對(duì)照組相比普通組CKBB值

9、明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01);與對(duì)照組相比重癥組CKBB值明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01);與普通組相比重癥組CKBB值明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01);可以認(rèn)為重癥手足口患兒、普通手足口患兒、一般兒童中血清CKBB水平有差別，重癥手足口病患兒高于普通手足口患兒，普通手足口患兒又高于一般兒童(見Table2)。
　　 3、血清S-100B蛋白比較；
　　 正態(tài)性檢驗(yàn)結(jié)果:普通組的P=0.

10、19，重癥組P=0.81，對(duì)照組P=0.67，都可認(rèn)為近似正態(tài)分布。方差齊性檢驗(yàn)P＜0.01，可以認(rèn)為方差不齊。F=423.711，P＜0.01，表明組間均數(shù)差異有統(tǒng)計(jì)性。再采用Dunnett'sT3法進(jìn)行均數(shù)間兩兩比較的結(jié)果:與對(duì)照組相比普通組S-100B值明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01);與對(duì)照組相比重癥組S-100B值明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01);與普通組相比重癥組S-100B值明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(

11、P＜0.01);可以認(rèn)為重癥手足口患兒、普通手足口患兒、一般兒童中血清S-100B蛋白水平有差別，重癥手足口病患兒高于普通手足口患兒，普通手足口患兒又高于一般兒童（見Table3）。
　　 4、重癥手足口病患兒腦電圖異常與臨界異常病例NSE含量比較；
　　 正態(tài)性檢驗(yàn)結(jié)果:腦電圖異常組的P=0.28，腦電圖正常組P=0.44，都可認(rèn)為近似正態(tài)分布。方差齊性檢驗(yàn)P＜0.01，可以認(rèn)為方差不齊。F=637.012，P＜0.0

12、1，表明組間均數(shù)差異有統(tǒng)計(jì)性。再采用Dunnett's T3法進(jìn)行均數(shù)間兩兩比較的結(jié)果:重癥手足口病患兒腦電圖異常組血清NSE含量高于腦電圖臨界異常組，有顯著性意義，(P＜0.01)。可以認(rèn)為重癥手足口病患兒腦電圖異常病例與腦電圖臨界異常病例血清NSE水平有差別（見Table4）。
　　 5、重癥手足口病患兒腦電圖異常與臨界異常病例CKBB含量比較；
　　 正態(tài)性檢驗(yàn)結(jié)果:腦電圖異常組的P=0.62，腦電圖正常組P=0.

13、84，都可認(rèn)為近似正態(tài)分布。方差齊性檢驗(yàn)P＜0.01，可以認(rèn)為方差不齊。F=831.025，P＜0.01，表明組間均數(shù)差異有統(tǒng)計(jì)性。再采用Dunnett's T3法進(jìn)行均數(shù)間兩兩比較的結(jié)果:重癥手足口病患兒腦電圖異常組血清CKBB含量高于腦電圖臨界異常組，有顯著性意義，(P＜0.01)。可以認(rèn)為重癥手足口患兒腦電圖異常病例與腦電圖臨界異常病例血清CKBB水平有差別（見Table5）
　　 6、重癥手足口病患兒腦電圖異常與臨界異常

14、病例S-100B蛋白含量比較；
　　 正態(tài)性檢驗(yàn)結(jié)果:腦電圖異常組的P=0.45，腦電圖正常組P=0.85，都可認(rèn)為近似正態(tài)分布。方差齊性檢驗(yàn)P＜0.01，可以認(rèn)為方差不齊。F=534.042，P＜0.01，表明組間均數(shù)差異有統(tǒng)計(jì)性。再采用Dunnett's T3法進(jìn)行均數(shù)間兩兩比較的結(jié)果:重癥手足口病患兒腦電圖異常組血清S-100B蛋白含量高于腦電圖臨界異常組，有顯著性意義，（P＜0.01）?？梢哉J(rèn)為重癥手足口患兒腦電圖異常病

15、例與腦電圖臨界異常病例血清S-100B蛋白水平有差別(Table6)。
　　 結(jié)論:
　　 1、EV71手足口病合并腦炎時(shí)不僅存在神經(jīng)元損傷，亦存在神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞及血腦屏障損傷。
　　 2、正常兒童血清中神經(jīng)元特異性烯醇化酶(NSE)和血清肌酸激酶腦型同工酶(CKBB)、S-100B蛋白含量低微，說明其不受其他因素干擾，可作為腦損傷的特異性生化指標(biāo)。
　　 3、普通病例血清中NSE、CKBB、S-100B蛋