高通量連續(xù)性血液濾過技術對膿毒血癥患者外周血單個核細胞miRNA-146a的影響.pdf

1、目的:前瞻性觀察高通量連續(xù)性血液濾過治療(HVHF)對嚴重膿毒性癥患者外周血單個核細胞中miRNA-146a表達的影響，并探討HVHF治療對膿毒癥發(fā)揮作用可能的機制。
　　 方法:將2011年3月至2012年9月入住該院重癥醫(yī)學科，符合納入標準的在接受常規(guī)治療同時接受HVHF治療的嚴重膿毒癥患者15例，設為HVHF組，另選15例患者與HVHF組配對的性別相同，年齡和APACHEⅡ評分相近，符合納入標準的但因某些原因未能行HVHF

2、治療而其余治療措施相同的嚴重膿毒癥患者作為對照組。常規(guī)治療指原發(fā)病的治療、抗生素、血管活性藥物、營養(yǎng)對癥支持治療、維持水電解質酸堿平衡及機械通氣等治療;HVHF治療指在常規(guī)治療的基礎上聯合高通量血液濾過(HVHF)治療，置換量設為4L/h;
　　 1.在兩組治療過程的0h，6h，12h，24 h，48 h時相點，抽取患者外周靜脈血，用密度梯度離心法分離外周血單個核細胞，用RNA提取試劑盒(miRNeasy MiniKit)提取總

3、RNA，熒光定量PCR法檢測miRNA-146a表達量的變化。
　　 2.兩組患者入科接受治療24 h后分離出外周血單個核細胞并于體外培養(yǎng)，以脂多糖(LPS)刺激，分別在4h、8h、12h、24 h、48 h時相點收集單個核細胞并檢測單個核細胞中miRNA-146a表達量的變化;同時以ELISA法檢測單個核細胞培養(yǎng)液中TNF-a，IL-6，IL-10水平。
　　 結果:
　　 1、兩組患者外周血單個核細胞的miR

4、NA-146a表達水平變化:兩組患者外周血單個核細胞miRNA-146a表達量較治療前均有所下調，但HVHF組較對照組下調更顯著;
　　 2、兩組患者體外培養(yǎng)的單個核細胞分泌功能變化:HVHF組體外孵育的外周血單個核細胞在LPS刺激下于各個時相點培養(yǎng)液中TNF-a、IL-6的分泌水平均明顯高于對照組;HVHF組TNF-a、IL-6分泌量在12h達最高值，而對照組在8h即達最高值;兩組細胞IL-10分泌水平均持續(xù)升高，兩組間各時相

5、點IL-10分泌水平無明顯差異;
　　 3、兩組患者體外培養(yǎng)的單個核細胞miRNA-146a表達變化:HVHF組體外孵育的外周血單個核細胞在LPS刺激下miRNA-146a表達量較孵育前有所升高，在12h時相升高明顯，對照組在孵育前及孵育4、8h時相點miRNA-146a表達都處于高水平狀態(tài)，明顯高于同時相的HVHF組。
　　 結論:高通量連續(xù)性血液濾過治療(HVHF)通過大量清除膿毒癥患者血循環(huán)中的炎癥因子及促炎介質及