膿毒血癥血管內(nèi)皮功能的細胞標記物研究.pdf

1、目的：檢測成人外周血循環(huán)內(nèi)皮細胞（CECs）計數(shù)的正常值，為開展相關(guān)研究奠定基礎(chǔ)；通過臨床研究觀察和分析膿毒血癥時CECs及內(nèi)皮細胞微粒（EMPs）數(shù)量的變化及其意義，初步探討其變化可能的機制。 方法：排除已知影響因素，以CD45-/CD146+為表型標志，采用流式細胞學(xué)方法（FCM）檢測健康成人CECs數(shù)量，統(tǒng)計并確立正常值范圍；對排除已知影響因素的31例入選膿毒血癥患者（2007年10月至2008年5月，上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附

2、屬瑞金醫(yī)院SICU），于不同時間點（膿毒血癥診斷明確第1、2、3、7、14天）采用FCM檢測CECs及EMPs數(shù)量，其中CECs以CD45-/CD146+為表型，EMPs以CD31+/Annexin－V＋為表型。同時用血漿與體外培養(yǎng)的內(nèi)皮細胞株共孵育48小時，采用FCM檢測其凋亡比例，并用ELISA法檢測血漿TNF-α、IL-1β、IL-4和IL一10水平。并按診斷當天APACHEII評分分為輕度組（<9分）、中度組（9～15分）和重度

3、組（>15分），各組按病情轉(zhuǎn)歸分為存活組及死亡組。 結(jié)果：健康成人CECs計數(shù)的正常參考范圍是0.6～36.9個/105PBMCs，不同年齡及性別組其數(shù)量沒有顯著差異；膿毒血癥患者隨著病情的加重，EMPs、TNF-α及IL-1β均顯著增高（P<0.05），中度組CECs及IL-10較輕度組增高，但重度組CECs顯著低于輕、中度組（P<0.05），重度組IL－4及IL-10低于中度組；死亡及存活組EMPs隨病情程度加重而升高，死亡

4、患者血中EMPs及促炎因子顯著高于同病情組存活者（P<0.05），而CECs及抑炎因子顯著低于同病情組存活者（P<0.05）；膿毒血癥患者血漿與內(nèi)皮細胞株共孵育時，血漿中微生物造成嚴重污染，內(nèi)皮細胞均凋亡，流式細胞術(shù)檢測凋亡率無意義。 結(jié)論：①以CD45-/CD146+為表型標記，采用FCM檢測方法，健康成年人CECs數(shù)量的正常范圍是0.6～36.9個/105PBMCs。②膿毒血癥患者內(nèi)皮功能受損，CECs及EMPs水平可作為反