Roux-en-Y胃旁路術(shù)對(duì)2型糖尿病大鼠腎臟糖異生影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、研究背景和研究目的:
　　糖尿病是當(dāng)前常見(jiàn)的內(nèi)分泌疾病,其中90％以上者為2型糖尿病(type2 diabetes mellitus,T2DM)。傳統(tǒng)的單一藥物治療或者聯(lián)合飲食控制、加強(qiáng)運(yùn)動(dòng)等治療方法均不能徹底治愈糖尿病,更不能有效的防止糖尿病各種并發(fā)癥的發(fā)生以及病情的逐漸惡化。而以Roux-en-Y胃旁路術(shù)為代表的減重手術(shù)對(duì)代謝綜合征及T2DM患者卻取得了令人鼓舞的治療效果,但迄今,其治療T2DM的相關(guān)機(jī)理尚不完全清楚。業(yè)已證實(shí)

2、,胃旁路術(shù)后能夠增加肝臟、骨骼肌和脂肪組織等胰島素靶器官對(duì)胰島素的敏感性和反應(yīng)性,改善上述器官對(duì)葡萄糖的代謝功能,增加糖的利用和貯存并減少內(nèi)源性糖的產(chǎn)生。近年的研究表明腎臟在維持人體內(nèi)血糖平衡方面同樣具有重要的作用,除了肝臟,腎臟皮質(zhì)同樣含有大量糖異生相關(guān)的酶,能夠在各種生理?xiàng)l件下通過(guò)糖異生途徑產(chǎn)生足夠多的葡萄糖并釋放進(jìn)入血液循環(huán)。在糖尿病狀態(tài)下,腎臟也存在胰島素抵抗現(xiàn)象,且腎糖輸出增多?；谝陨险J(rèn)識(shí),本研究以SD大鼠為實(shí)驗(yàn)對(duì)象,在建立

3、T2DM大鼠模型的基礎(chǔ)上,觀察胃旁路術(shù)后對(duì)T2DM大鼠腎臟糖異生的影響,旨在對(duì)胃旁路術(shù)的降糖作用及其可能機(jī)制進(jìn)行初步探討。
　　實(shí)驗(yàn)方法:采用高脂飲食聯(lián)合腹腔注射小劑量鏈脲佐菌素(STZ,35mg/kg)方法建立2型糖尿病大鼠模型,將造模成功的糖尿病大鼠按隨機(jī)數(shù)字表法分為三組:即糖尿病模型組(DM group),假手術(shù)組(SRYGB group)和手術(shù)組(RYGB group);另取8只正常SD大鼠作為正常對(duì)照組(NC group

4、)。手術(shù)組大鼠行Roux-en-Y胃旁路術(shù),假手術(shù)組大鼠行胃竇十二指腸離斷原位吻合術(shù),糖尿病模型組和正常對(duì)照組大鼠不作手術(shù)干預(yù)。分別于術(shù)前和術(shù)后4周采用全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)各組大鼠血清總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)和游離脂肪酸(FAA)含量;術(shù)前和術(shù)后1、2和4周,采用放射免疫法檢測(cè)各組大鼠空腹血清胰島素水平,同時(shí)行口服糖耐量試驗(yàn)(OGTT),計(jì)算血糖濃度-時(shí)間曲線下面積(AUC)和胰島素敏感指數(shù)(ISI)。術(shù)后4周,獲取腎臟組織標(biāo)

5、本,采用實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)檢測(cè)腎臟組織中糖異生關(guān)鍵酶:葡萄糖-6-磷酸酶(G-6-P)和磷酸烯醇式丙酮酸激酶(PEPCK)的mRNA相對(duì)表達(dá),采用Western blot技術(shù)檢測(cè)G-6-P、PEPCK、胰島素受體α(InR-α)和胰島素受體β(InR-β)蛋白表達(dá)量。
　　實(shí)驗(yàn)結(jié)果:分別于術(shù)前及術(shù)后1、2和4周,通過(guò)各項(xiàng)指標(biāo)的檢測(cè)有以下發(fā)現(xiàn):
　　1、術(shù)前同時(shí)相點(diǎn)DM組大鼠空腹血糖、血脂水平和AUC值均

6、明顯高于NC組大
　　鼠水平,DM組大鼠ISI較NC組大鼠明顯降低,而空腹血清胰島素水平在兩組大鼠間無(wú)明顯差異;
　　2、術(shù)后4周RYGB組大鼠血清總膽固醇、甘油三酯和游離脂肪酸水平較DM組和SRYGB組大鼠水平明顯降低;
　　3、術(shù)后1、2和4周RYGB組大鼠空腹和OGTT2小時(shí)血糖水平顯著低于DM組和SRYGB組大鼠水平,RYGB組大鼠較DM組和SRYGB組大鼠,其AUC值明顯減小,ISI增高;
　　4、術(shù)后

7、4周DM組和SRYGB組大鼠G-6-P和PEPCK mRNA的相對(duì)表達(dá)及蛋白表達(dá)量較NC組明顯升高,其InR-α的蛋白表達(dá)量較NC組大鼠降低。而RYGB組大鼠G-6-P和PEPCK mRNA的相對(duì)表達(dá)及蛋白表達(dá)量較DM組和SRYGB組大鼠明顯降低,其InR-α的蛋白表達(dá)量較DM組和SRYGB組大鼠有一定升高,但I(xiàn)nR-β的蛋白表達(dá)量在各組間沒(méi)有明顯差異。
　　結(jié)論:
　　1、高脂飲食聯(lián)合腹腔小劑量鏈脲佐菌素注射制備T2DM大

8、鼠模型,該模型大鼠表現(xiàn)為中度高血糖、胰島素抵抗和高血脂,糖耐量嚴(yán)重受損,能夠較好的模擬T2DM的發(fā)生和發(fā)展過(guò)程。其次該模型大鼠存在腎臟胰島素抵抗現(xiàn)象,且腎臟糖異生增強(qiáng)。
　　2、Roux-en-Y胃旁路術(shù)后能改善2型糖尿病大鼠脂質(zhì)代謝功能,降低其血脂水平。
　　3、Roux-en-Y胃旁路術(shù)后能顯著降低2型糖尿病大鼠血糖水平,改善受損的糖耐量,提高機(jī)體胰島素敏感性,并減輕腎臟胰島素抵抗,降低腎臟糖異生關(guān)鍵酶的表達(dá),減弱腎臟糖