薏米提取物對大鼠潰瘍性結(jié)腸炎防治作用研究.pdf

1、目的：
　　 測定薏米提取物組成成分，并研究薏米提取物對葡聚糖硫酸鈉(DSS)誘導(dǎo)的Wistar大鼠潰瘍性結(jié)腸炎(UC)的防治作用，并從抗氧化損傷、免疫調(diào)節(jié)以增強(qiáng)粘膜屏障保護(hù)等方面探討其可能的作用機(jī)制。
　　 方法：
　　 1．薏米提取物成分測定：運用凱氏定氮法、液相色譜法、索氏抽提法、氣相色譜法分別測定蛋白質(zhì)含量、氨基酸構(gòu)成、粗脂肪含量和脂肪酸組成；運用酶重量法測定總膳食纖維、可溶性膳食纖維、不可溶性膳食纖維含

2、量，原子吸收法測定鐵、鋅含量，EDTA法、熒光法測定鈣、硒含量，重量法測定灰分含量。
　　 2．薏米提取物對UC防治作用研究：健康成年Wistar大鼠30只，雌雄各半，隨機(jī)分為3組，正常對照組、DSS模型組、薏米提取物干預(yù)組，除正常對照組飲水外，DSS模型組、薏米提取物干預(yù)組大鼠自由飲用5％DSS溶液用于制備大鼠UC模型。薏米提取物干預(yù)組用薏米提取物混懸液連續(xù)灌胃，其余兩組等量蒸餾水灌胃。通過疾病活動指數(shù)(DAI)評分、結(jié)腸肉眼

3、大體評分、組織病理學(xué)評分、腸壁厚度、臟器系數(shù)評價疾病一般情況、結(jié)腸形態(tài)和病理學(xué)改變。生化法檢測血清MPO及血清和結(jié)腸組織SOD和GSH-PX活性、MDA含量及總抗氧化能力(T-AOC)。酶聯(lián)免疫法(ELISA)檢測血清TNF-α水平。免疫組化法反映結(jié)腸HSP70表達(dá)。實時熒光定量RT-PCR方法（SYBRGreen相對定量法）測定結(jié)腸HSP70mRNA表達(dá)水平。
　　 結(jié)果：
　　 1．薏米提取物成分測定：蛋白質(zhì)12.4

4、%、氨基酸總和（17種，以谷氨酸、丙氨酸、亮氨酸為主）11.62%、粗脂肪8.15%、6種明確的脂肪酸（以油酸、亞油酸、棕櫚酸、棕櫚一烯酸為主）、總膳食纖維15%（其中可溶性膳食纖維0.58%）、鐵2.78mg/100g、鋅1.16mg/100g、鈣99.30mg/100g、硒4.07μg/100g、灰分0.645mg/100g。
　　 2．DSS模型組大鼠DAI評分高于正常對照組及干預(yù)組，薏米提取物干預(yù)組DAI評分低于模型組但

5、高于正常對照組，且隨干預(yù)時間持續(xù)而逐漸降低。模型組結(jié)腸肉眼大體評分、組織病理學(xué)評分均顯著高于正常對照組(P<0.01)，腸壁厚度較對照組有增厚趨勢，胸腺／脾臟系數(shù)無差別。薏米提取物能明顯改善UC大鼠結(jié)腸大體形態(tài)、組織病理情況以及腸壁厚度。造模終點模型組血清MPO活性升高(P<0.05)，干預(yù)組血清MPO活性低于模型組(P<0.05)。
　　 3．模型組大鼠較正常組血清MDA含量增加且血清SOD、GSH-PX活性降低(P<0.05

6、)，薏米提取物能明顯降低血清MDA含量(P<0.01)，升高血清SOD、GSH-PX活性(P<0.01)和組織SOD、GSH-PX活性(P<0.05)。
　　 4．模型組血清TNF-a表達(dá)水平高于正常組(P<0.05)，干預(yù)組TNF-α表達(dá)水平低于模型組(P<0.01)但高于正常組(P<0.01)。
　　 5.各組大鼠均不同程度存在HSP70蛋白表達(dá)，模型組HSP70IOD值高于對照組(P<0.05)，干預(yù)組HSP70I

7、OD顯著高于其它兩組(P<0.01)。
　　 6．模型組HSP70mRNA表達(dá)水平高于對照組(P<0.05)，干預(yù)組HSP70mRNA表達(dá)水平高于其它兩組(P<0.01)。
　　 結(jié)論：
　　 薏米提取物能顯著改善UC一般狀況及炎癥損傷，降低血清MDA含量，增加SOD和GSP-PX活性，提高HSP70表達(dá)水平并抑制TNF-α表達(dá)，通過抗氧化作用及免疫調(diào)節(jié)作用對DSS誘導(dǎo)的大鼠UC有防治作用。薏米提取物具有豐富的營