普羅布考通過誘導(dǎo)血紅素加氧酶1發(fā)揮抗動脈粥樣硬化作用.pdf

1、研究背景:
　　 隨著對氧化型低密度脂蛋白(oxidizedlowdensitylipoprotein，ox-LDL)參與動脈粥樣硬化(atherosclerosis，AS)形成和發(fā)展的學(xué)說認(rèn)識的加深，國內(nèi)外學(xué)者已經(jīng)將抗氧化劑用于抗AS的研究。其中普羅布考是FDA唯一認(rèn)證的抗氧化藥物，最初以降脂藥應(yīng)用于臨床，近幾年發(fā)現(xiàn)其具有抗氧化、降脂外的其他作用，如改善血管內(nèi)皮功能、抑制平滑肌細(xì)胞增殖等。動物實(shí)驗(yàn)及臨床研究顯示普羅布考具有抗A

2、S作用，但其具體作用機(jī)制尚未完全闡明。
　　 血紅素加氧酶(HemeOxygenase，HO)系統(tǒng)是血紅素氧化的起始酶和限速酶，其主要功能是分解血紅素生成膽綠素、一氧化碳和游離鐵，膽綠素隨后被進(jìn)一步還原成膽紅素，游離鐵與轉(zhuǎn)鐵蛋白結(jié)合。HO在體內(nèi)有HO-1、HO-2、HO-3三種同工酶。HO-1為誘導(dǎo)型，廣泛分布于脾臟、肝臟、網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)和骨髓等組織，能在血管內(nèi)皮細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞中低水平地表達(dá)。現(xiàn)已證實(shí)，HO-1是一種應(yīng)激蛋白，在

3、應(yīng)激狀態(tài)下適量表達(dá)可以減輕細(xì)胞損傷、蛋白質(zhì)氧化及脂質(zhì)過氧化。近來的動物實(shí)驗(yàn)表明，增加HO-1表達(dá)可明顯減輕AS病變程度;臨床研究亦發(fā)現(xiàn)，人類HO-1表達(dá)水平與冠心病發(fā)病和冠脈支架術(shù)后再狹窄相關(guān)，更體現(xiàn)HO-1在AS中的重要作用。最近有國外文獻(xiàn)報(bào)道，普羅布考可在動物體內(nèi)外上調(diào)HO-1mRNA的表達(dá)，因此我們推測，普羅布考有可能通過誘導(dǎo)HO-1的產(chǎn)生進(jìn)而發(fā)揮其抗AS作用。本研究通過建立兔腹主動脈粥樣硬化模型，應(yīng)用錫原卟啉-9抑制體內(nèi)HO-1

4、的活性，觀察斑塊形態(tài)、組成及血清氧化、炎性因子的水平，進(jìn)一步研究普羅布考對斑塊進(jìn)展及穩(wěn)定性的影響，探討HO-1在普羅布考抗動脈粥樣硬化作用機(jī)制中的地位。
　　 研究目的:
　　 (1)建立兔腹主動脈AS模型;
　　 (2)研究在AS發(fā)生發(fā)展中，口服普羅布考對主動脈壁內(nèi)HO-1表達(dá)及活性的影響;
　　 (3)通過檢測血清中氧化因子、炎癥因子的水平，觀測斑塊的病理形態(tài)及組成，探討普羅布考抗AS的作用;

5、　　 (4)探討HO-1在普羅布考抗動脈粥樣硬化作用中的地位，為AS的臨床防治提供理論和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　 研究對象及方法:
　　 高脂飲食加腹主動脈內(nèi)膜剝脫術(shù)建立兔動脈粥樣硬化模型后，60只成模雄性新西蘭兔隨機(jī)分為高脂對照組、錫原卟啉-9（SnPP-(Ⅸ)，HO-1抑制劑）組、普羅布考組、普羅布考+SnPP-(Ⅸ)組，每組15只，持續(xù)藥物干預(yù)12周，24周末檢測各組血脂，血清中氧化低密度脂蛋白、白介素-18、基質(zhì)金屬蛋

6、白酶-9和超敏感C反應(yīng)蛋白的水平;觀測斑塊的病理形態(tài)及組成;通過免疫組織化學(xué)法觀察腹動脈組織中HO-1的表達(dá)，實(shí)時(shí)定量RT-PCR檢測HO-1mRNA的表達(dá)，酶法檢測HO活性的變化。
　　 結(jié)果:
　　 與對照組相比，普羅布考組斑塊內(nèi)HO-1的表達(dá)及活性顯著增加，主動脈斑塊面積、內(nèi)-中膜厚度顯著減小，斑塊纖維帽厚度增加，斑塊內(nèi)巨噬細(xì)胞浸潤減少，血清中氧化低密度脂蛋白及炎癥因子的水平降低（P均＜0.01）。使用錫原卟啉-9