人唇腺中趨化性細(xì)胞因子CCL28的表達(dá)研究.pdf

1、趨化性細(xì)胞因子是細(xì)胞因子中的一種，該家族是一個(gè)小分子（8—16kDa）蛋白質(zhì)的超家族，在氨基酸序列上存在20—70%的同源性。根據(jù)半胱氨酸的位置、排列方式及數(shù)量的不同，其被分為四類(lèi)：CXC類(lèi)（α）趨化性細(xì)胞因子、CC類(lèi)（β）趨化性細(xì)胞因子、C類(lèi)（γ）趨化性細(xì)胞因子、CXXXC類(lèi)（δ）趨化性細(xì)胞因子。 CCL28是2000年發(fā)現(xiàn)的一種新的趨化性細(xì)胞因子，它屬于上述分類(lèi)中的CC類(lèi)，曾被稱(chēng)為粘膜相關(guān)上皮趨化性細(xì)胞因子（MEC）。其可

2、介導(dǎo)循環(huán)中的IgA抗體分泌細(xì)胞跨過(guò)血管壁向局部實(shí)體組織內(nèi)遷徙。 口腔中的SIgA是口腔免疫防御機(jī)制中至關(guān)重要的因素之一，主要來(lái)自大、小涎腺，其中來(lái)自小涎腺的約占30—35%。Pan等人應(yīng)用斑點(diǎn)雜交分析證明人體的多種組織中均表達(dá)CCL28，其中以結(jié)腸、氣管、大涎腺、乳腺表達(dá)較豐富。人大涎腺表達(dá)的CCL28，一方面可介導(dǎo)IgA+ ASC由血循環(huán)向涎腺實(shí)體組織中遷徙，另一方面還可隨唾液分泌到口腔中發(fā)揮殺菌抑菌作用。國(guó)內(nèi)李瀟的研究表明，

3、在唾液中IgA的水平與CCL28的含量具有相關(guān)性。然而，迄今為止對(duì)人小涎腺中CCL28的表達(dá)和分泌情況尚無(wú)研究報(bào)道。因此，本課題的目的在于以唇腺組織為研究對(duì)象，從不同角度證實(shí)小涎腺中表達(dá)CCL28，從而為探討小涎腺在維持口腔IgA水平方面的作用奠定基礎(chǔ)。 方法： 1）應(yīng)用實(shí)時(shí)熒光相對(duì)定量PCR技術(shù)來(lái)證實(shí)人的唇腺組織中表達(dá)CCL28 mRNA。 2）應(yīng)用寡核苷酸探針原位雜交來(lái)檢測(cè)唇腺組織中CCL28 mRNA的表達(dá)

4、部位。 3）應(yīng)用免疫組織化學(xué)來(lái)檢測(cè)唇腺組織中CCL28蛋白的表達(dá)和分布情況。 結(jié)果： 1）實(shí)時(shí)熒光相對(duì)定量PCR結(jié)果表明健康成人的唇腺組織中表達(dá)豐富的CCL28mRNA。經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，其表達(dá)量（170．67±77．44）顯著高于大腸對(duì)照組（19．50±14．55）（P<0．001）。其后的唇腺和腮腺CCL28表達(dá)比較表明，前者中的表達(dá)量（1．28±0．57）顯著高于后者（0．79±0．24）（P<0．01）。

5、 2）原位雜交顯示CCL28 mRNA存在于腺泡上皮細(xì)胞胞漿中。 3）免疫組織化學(xué)顯示唇腺腺泡上皮細(xì)胞胞漿、腺管上皮細(xì)胞、泡內(nèi)粘液中均存在CCL28蛋白。但其染色深淺存在差異，這表明這幾處CCL28蛋白的濃度不同。 結(jié)論： 同大涎腺一樣，健康成人的唇腺中也表達(dá)豐富的CCL28，且其表達(dá)量高于腮腺。CCL28 mRNA表達(dá)于腺泡上皮細(xì)胞胞漿中，其翻譯得到的蛋白質(zhì)一部分在唇腺中發(fā)揮趨化作用，以吸引IgA+ ASC