結(jié)締組織生長因子對足細胞表達整合素連接激酶、nephrin及desmin的影響.pdf

1、目的:蛋白尿是慢性腎臟疾病最常見的臨床表現(xiàn)之一。足細胞損傷在蛋白尿發(fā)生和腎小球硬化的形成中起著重要作用。近年來研究發(fā)現(xiàn)，上皮-間充質(zhì)轉(zhuǎn)分化(epithelial mesenchymal transition，EMT)不僅發(fā)生在腎小管上皮細胞中，腎小球臟層上皮細胞即足細胞也會發(fā)生EMT。整合素連接激酶(integrin linkedkinase，ILK)是一種重要的細胞內(nèi)信號分子，大量研究發(fā)現(xiàn)，ILK上調(diào)是足細胞損傷的共同反應(yīng)。本研究擬觀

2、察CTGF對體外培養(yǎng)的足細胞ILK、nephrin和desmin表達以及細胞表面形態(tài)改變的影響，以進一步探討CTGF介導(dǎo)足細胞損傷的機制。
　　 方法:不同濃度rhCTGF(0、10、50ng/ml)干預(yù)足細胞24小時，觀察rhCTGF對ILK、nephrin及desmin表達影響的濃度效應(yīng)。以濃度為50ng/ml的rhCTGF干預(yù)足細胞0、24、48小時，觀察rhCTGF對ILK、nephrin及desmin表達影響的時間效應(yīng)

3、。分別用real time RT-PCR方法和Western blot方法檢測ILK、nephrin及desmin mRNA表達水平和蛋白表達水平。采用掃描電鏡技術(shù)(scanningelectron microscopy, SEM)觀察rhCTGF對足細胞表面形態(tài)改變的影響。
　　 結(jié)果:在基礎(chǔ)狀態(tài)下，足細胞表達其上皮標志蛋白nephrin及少量間充質(zhì)標志蛋白desmin，隨著rhCTGF濃度增加，與對照組相比，desmin表達

4、顯著增加(P＜0.05)，而nephrin表達顯著下降(P＜0.05);rhCTGF刺激24小時，足細胞desmin表達上調(diào)(P＜0.05)，而nephrin表達下調(diào)(P＜0.05)，隨著rhCTGF作用時間的延長，足細胞desmin表達進一步增加(P＜0.05)，而nephrin表達進一步減少(P＜0.05)。在基礎(chǔ)狀態(tài)下，足細胞表達一定量的ILK，rhCTGF能上調(diào)足細胞ILK表達。掃描電鏡顯示，對照組足細胞胞體表面相對光滑，微絨毛