氟伐他汀對(duì)腎小球系膜細(xì)胞增殖及結(jié)締組織生長(zhǎng)因子、Ⅳ型膠原表達(dá)的影響.pdf

1、目的：觀察氟伐他汀(Flu)對(duì)轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β<,1>(TGF-β<,1>)誘導(dǎo)下的大鼠腎小球系膜細(xì)胞(MCs)增殖和結(jié)締組織生長(zhǎng)因子(CTGF)、IV型膠原(Col IV)表達(dá)的影響，探討其腎臟保護(hù)作用的可能機(jī)制。 方法：選擇處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的MCs，分成對(duì)照組，不同濃度TGF-β<,1>誘導(dǎo)組，TGF-β<,1>不同時(shí)間誘導(dǎo)組，TGF-β<,1>加不同濃度Flu誘導(dǎo)組，采用MTT法檢測(cè)MCs增殖，RT-PCR和Western

2、Blot方法檢測(cè)MCs CTGF表達(dá)，ELISA法檢測(cè)Col Ⅳ表達(dá)。此外，用不同濃度外源性CTGF誘導(dǎo)MCs后，用ELISA法檢測(cè)MCs Col Ⅳ表達(dá)。 結(jié)果：(1)MCs的增殖隨著TGF-β<,1>濃度的增加而增加，TGF-β<,1>,濃度達(dá)到5ng/ml時(shí)MCs的增殖達(dá)到高峰；當(dāng)TGF-β<,1>濃度超過10ng/ml時(shí)，MCs的增殖隨著TGF-β<,1>濃度的增加而減少，TGF-β<,1>濃度達(dá)到30ng/ml時(shí)，MC

3、s細(xì)胞數(shù)接近正常對(duì)照組。在5ng/ml TGF-β<,1>誘導(dǎo)下，MCs的增殖隨著Flu濃度的增加而逐漸下降，1μmol/LFlu即可明顯抑制MCs增殖，P<0.01。(2)在10ng/ml TGF-β<,1>誘導(dǎo)下，MCs的CTGFmRNA和蛋白表達(dá)隨著時(shí)間的延長(zhǎng)而增加，其中mRNA在9h時(shí)表達(dá)達(dá)到高峰，蛋白在12h時(shí)表達(dá)達(dá)高峰。MCs的CTGFmRNA和蛋白表達(dá)隨著TGF-β<,1>濃度的增加而增加，10ng/ml的誘導(dǎo)濃度下CTG

4、FmRNA和蛋白表達(dá)都達(dá)到高峰。5ng/ml TGF-β<,1>誘導(dǎo)下的MCs CTGF mRNA和蛋白的表達(dá)隨Flu濃度的增加而降低：1μmol/L Flu即能明顯抑制mRNA的表達(dá)，P<0.01；10μmol/L Flu即能明顯抑制蛋白的表達(dá)，P<0.01。(3)5ng/ml TGF-β<,1>能明顯促進(jìn)MCs Col Ⅳ的表達(dá)，P<0.01。5ng/ml TGF-β<,1>誘導(dǎo)下的MCsCol Ⅳ的表達(dá)隨著Flu濃度的增加而逐漸下

5、降，0.1μmol/L Flu即能明顯抑制Col Ⅳ蛋白的表達(dá)，P<0.01。(4)外源性CTGF誘導(dǎo)MCs后，Col Ⅳ的表達(dá)隨CTGF濃度的增加而增加，2.5ng/ml CTGF即可明顯促進(jìn)Col Ⅳ蛋白的表達(dá)，P<0.05。 結(jié)論：(1)TGF-β<,1>可呈劑量及時(shí)間依賴性誘導(dǎo)MCs增殖以及MCs CTGFmRNA和蛋白的表達(dá)。(2)氟伐他汀可呈劑量依賴性地抑制TGF-β<,1>誘導(dǎo)下MCs的增殖及CTGFmRNA和蛋白