實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)骨肉瘤病人血清中microRNA的表達(dá).pdf

1、目的：探索骨肉瘤病人血清中相關(guān)miRNA的表達(dá)水平，為進(jìn)一步研究miRNA與骨肉瘤的診斷和治療做基礎(chǔ)。
　　 方法：應(yīng)用莖-環(huán)狀反轉(zhuǎn)錄引物實(shí)時(shí)熒光定量PCR（stemloop RT-Qpcr，TaqMan探針?lè)ǎz測(cè)骨肉瘤病人血清中相關(guān)miRNA的表達(dá)水平，其中骨肉瘤病人未化療組血清10例，骨肉瘤病人化療組血清10例和健康人血清10例。以U6snRNA為內(nèi)參，檢測(cè)miR29c，miR-132，miR-199a-3p，miR-22

2、1在血清中的表達(dá)水平。分析骨肉瘤臨床病理特征與miRNA表達(dá)水平之間的關(guān)系。所有資料輸入SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件中處理，以α＝0.05作為檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)。
　　 結(jié)果：⑴4種miRNA在所有血清標(biāo)本中都能檢測(cè)到。⑵與健康人比較，miR-29c，miR-221在骨肉瘤病人血清中的表達(dá)水平上調(diào)，P＜0.05;miR-199a-3p和miR-132沒(méi)有明顯差別，P＞0.05。⑶4種miRNA在骨肉瘤病人血清中的表達(dá)水平與病理分級(jí)、病理分型、

3、Enneking外科分期、ALP無(wú)關(guān)，P＞0.05。⑷4種miRNA在骨肉瘤病人血清中的表達(dá)水平未化療組與化療組之間無(wú)明顯差異，P＞0.05。
　　 結(jié)論：①人血清中存在miRNA并且可以方便的應(yīng)用實(shí)時(shí)熒光定量PCR進(jìn)行檢測(cè)；stem-loop RT-qPCR（TaqMan探針?lè)ǎz測(cè)法是靈敏的，特異的，方便的定量檢測(cè)miRNA的方法。②miR-29c和miR-221在骨肉瘤病人血清中的表達(dá)水平上調(diào)，可作為骨肉瘤的候選血清學(xué)生物