鱉甲活性多肽的制備工藝及其抗肝纖維化的藥效學研究.pdf

1、鱉甲為傳統(tǒng)中藥，來源于鱉科動物鱉(Trionyx sinensis Wiegmann)的背甲，具有滋陰潛陽，軟堅散結，退熱除蒸的功效，收載于歷年版《中國藥典》，主要用于治療陰虛發(fā)熱，虛風內動，癥瘕等病癥。諸多文獻報道，鱉甲及其為君藥的復方制劑臨床用于治療肝纖維化疾患，具有良好的療效?，F代藥理研究表明，鱉甲提取物具有明顯抗肝纖維化作用，但其發(fā)揮藥效的物質基礎不明確。本課題組前期細胞實驗研究結果顯示，鱉甲水提液中截止分子量6kD以下的肽類成

2、分能抑制肝星狀細胞(HSC-T6)增殖，提示其可能為鱉甲具有抗肝纖維化作用的活性部位。本論文在中醫(yī)藥理論的指導下，以前期的實驗研究為依據，采用現代科學技術，通過多學科交叉的研究方法，對鱉甲分子量小于6kD的活性多肽的制備工藝及其抗肝纖維化作用進行了研究，并初步探討了其抗肝纖維化的作用機理，為進一步將鱉甲開發(fā)研制成抗肝纖維化的創(chuàng)新中藥提供科學依據。
　　以多肽提取量和浸膏得率為指標，通過正交試驗考察料液比、提取時間、提取次數對鱉甲多

3、肽提取工藝的影響，得到了最佳提取工藝;以膜滲透通量或膜效能為指標，運用單因素試驗，考察了微濾、超濾的最佳條件，采用多級膜分離技術得到了鱉甲活性多肽的最佳膜分離工藝。
　　采用CCl4誘導大鼠肝纖維化模型，以大鼠血清中的ALT、AST、HA、LN、PCⅢ、(Ⅳ)-C，肝臟中的SOD、MDA、HYP含量及TIMP1、TGFβ-1的表達為指標，采用HE染色、透射電鏡觀察大鼠肝臟的顯微及超微結構，探討了鱉甲分子量小于6kD多肽對肝纖維化的

4、治療作用及其作用機制。實驗結果表明，鱉甲分子量小于6kD多肽能保護肝細胞，有效抑制大鼠肝纖維化，其抗肝纖維化的作用機制可能是鱉甲小分子多肽能提高機體對HA的降解能力，抑制PCⅢ、HYP的合成及TIMP1、TGFβ-1的表達，并可能通過抑制機體脂質過氧化反應，從而減輕肝纖維化程度。
　　飲酒導致酒精性肝病的發(fā)病率日漸升高，其早期病理表現為肝細胞氧化損傷，如不及時治療，嚴重者可引起酒精性肝纖維化。本論文探討了鱉甲水提液對急性酒精性肝損