蛹蟲草(Cordyceps militaris)生物學特性及發(fā)酵研究.pdf

1、冬蟲夏草是著名的傳統(tǒng)中藥和保健品，從17世紀開始就作為一種滋補藥在東西方國家得到廣泛應(yīng)用。蛹蟲草作為我國傳統(tǒng)的民間藥食兩用真菌，由于其活性成分和藥理作用與冬蟲夏草相似，因此具有很高的開發(fā)利用價值。但生長條件的特殊性決定了蛹蟲草野生資源稀少，再加上人們的過度采挖，造成了野生蛹蟲草資源短缺、價格昂貴，不能滿足巨大的市場需求。因而，探討蛹蟲草的高效人工培養(yǎng)方式成為藥用真菌研究領(lǐng)域的一大熱點。 該論文在本實驗室原有研究的基礎(chǔ)上對蛹蟲草C

2、ordyceps militaris Link．的鑒定、性質(zhì)及人工培養(yǎng)條件進行了研究。根據(jù)供試菌株菌絲的顯微結(jié)構(gòu)、子實體形態(tài)特征并結(jié)合ITS序列明確了其分類地位；以胞外多糖和蟲草素為考察指標，對該菌的液體發(fā)酵條件(營養(yǎng)因素、環(huán)境因子)進行了優(yōu)化；此外，還對蛹蟲草的雙向固體發(fā)酵進行了初步探討。 通過觀察蛹蟲草菌絲和子實體的顯微結(jié)構(gòu)，發(fā)現(xiàn)野生和人工培養(yǎng)的蛹蟲草子實體在外觀形態(tài)上差別較大；菌絲為有隔菌絲，在菌絲體頂端可形成分生孢子梗，

3、孢子梗頂端不膨大，無分枝，分生孢子呈球狀或橢圓狀，成串地著生于孢子梗上，這些特征與青霉極為相似；蛹蟲草子囊殼呈瓶狀，子囊線形、細長，平行排列在子囊殼內(nèi)；每個子囊內(nèi)有8個子囊孢子，子囊孢子有隔膜若干，具有擬青霉型產(chǎn)孢結(jié)構(gòu)。同時，ITS序列分析結(jié)果表明，該菌株與蛹草擬青霉對應(yīng)序列的相似度達到了99％。 菌絲固體培養(yǎng)研究結(jié)果表明，蛹蟲草菌絲在培養(yǎng)時最適的碳源、氮源分別是乳糖(或葡萄糖)和蛋白胨，在pH7.0～8.0、溫度28℃、黑暗的

4、環(huán)境條件下最適宜菌絲的生長。在搖瓶培養(yǎng)中，以菌絲體生物量和胞外多糖產(chǎn)量為目標產(chǎn)物，應(yīng)用正交實驗確定蛹蟲草液體發(fā)酵終點為7天，最優(yōu)碳源、氮源分別為葡萄糖和蛋白胨，蛹蟲革菌絲體最適宜在中性營養(yǎng)液中生長，而且當溫度為28℃左右時長勢最好。此外，在液體發(fā)酵中重點考察了添加銨根離子對蟲草素含量的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)銨根離子能夠顯著增加蟲草素的含量。 最后，首次對蛹蟲草的雙向固體發(fā)酵進行了初步探討，在固體培養(yǎng)基中添加了六種不同類型藥材的提取液，結(jié)