2型糖尿病患者糖原合成酶激酶3β(GSK-3β)基因表達(dá)研究.pdf

1、2型糖尿病(Type2 Diabetes Mellitus，T2DM)是一種多因素致病的疾病，它是由復(fù)雜的遺傳因素和環(huán)境因素共同作用的結(jié)果，目前對它的病因及發(fā)病機(jī)制尚無明確的闡述。其中胰島素信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路一直是人們研究的重點(diǎn)，而組成胰島素信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的相關(guān)分子更成為研究熱點(diǎn)，在過去20多年的廣泛研究中許多分子的功能作用逐步得到證實(shí)。而糖原合成激酶-3(Glycogen Synthase Kinase3，GSK-3)作為一種抑制糖原合成的限

2、速酶為人們所熟知，參與多種信號的調(diào)控，其中包括胰島素細(xì)胞信號傳導(dǎo)，以糖原合成激酶-3β(Glycogen Synthase Kinase3β，GSK-3β)亞型的作用為主，因此GSK-3β與2型糖尿病發(fā)生的相關(guān)性研究受到越來越多的重視。近年國內(nèi)外均有相關(guān)研究，提出GSK-3β的高表達(dá)與胰島素敏感性降低呈相關(guān)性，探討研究GSK-3β在患者體內(nèi)功能活性的異常增高等問題，同時(shí)開發(fā)GSK-3β抑制劑也已經(jīng)成為新藥開發(fā)熱點(diǎn)。比如，近年來有研究已經(jīng)

3、發(fā)現(xiàn)GSK-3β在2型糖尿病患者的骨骼肌及肝臟中蛋白表達(dá)量較健康人有明顯的增高，一些GSK-3的抑制劑在2型糖尿病以及阿爾茨海默病患者的離體細(xì)胞中及動(dòng)物模型中也能起到一定的治療作用?；谝陨腺Y料，我們了解到當(dāng)2型糖尿病發(fā)生時(shí)，GSK-3β在2型糖尿病患者體內(nèi)的蛋白表達(dá)量發(fā)生了異常改變，GSK-3β與2型糖尿病的發(fā)生存在關(guān)聯(lián)性。但這種關(guān)聯(lián)性尚不足以闡明GSK-3β本身對于2型糖尿病患者的主要作用機(jī)制，我們希望通過追溯到其基因表達(dá)的層面上來

4、了解GSK-3β在人體中的表達(dá)狀態(tài)。那么現(xiàn)在我們想知道GSK-3β作為一種絲/蘇氨酸蛋白激酶，當(dāng)激活各個(gè)相關(guān)途徑的時(shí)候，在患者體內(nèi)基因表達(dá)是否發(fā)生改變，最終可否影響與人體胰島素正常表達(dá)相關(guān)的各種信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑。為了驗(yàn)證GSK-3β是否是主動(dòng)參與2型糖尿病致病的重要因素，我們選取糖原合成激酶-3β為研究對象，采用SYBR實(shí)時(shí)熒光PCR技術(shù)研究2型糖尿病患者外周血有核細(xì)胞中的GSK-3β基因表達(dá)，探討其與2型糖尿病患者致病機(jī)制的相關(guān)性。

5、>　　 目的:
　　 運(yùn)用實(shí)時(shí)相對定量PCR技術(shù)檢測GSK-3β基因在2型糖尿病患者和健康人外周血有核細(xì)胞中表達(dá)量，探討GSK-3β在2型糖尿病患者體內(nèi)基因表達(dá)的臨床意義。
　　 方法:
　　 于早晨抽取2型糖尿病患者和健康人空腹靜脈血3ml，肝素抗凝，行常規(guī)生化檢測空腹血糖，總膽固醇，甘油三酯。設(shè)計(jì)GSK-3β基因引物，運(yùn)用實(shí)時(shí)熒光RT-PCR相對定量法檢測40例糖尿病患者和40例健康人PBMC內(nèi)基因表達(dá)水平

6、量，應(yīng)用Delta-Delta Ct法處理原始數(shù)據(jù)，比較并分析GSK-3β基因在人體表達(dá)的臨床意義及應(yīng)用價(jià)值。
　　 結(jié)果:
　　 1.2型糖尿病患者組空腹血糖、血漿總膽固醇、甘油三酯均高于健康對照組(P＜0.05)，年齡無差別(P＞0.05)。
　　 2.2型糖尿病患者組外周血有核細(xì)胞中GSK-3β的mRNA相對表達(dá)量為0.94±0.34，健康對照組為0.92±0.19，比較兩者無明顯差異(P＞0.05)。