亞低溫對(duì)大鼠全腦缺血再灌注海馬糖原合成酶激酶3β表達(dá)的影響.pdf

1、目的：大鼠全腦缺血再灌注后，觀察糖原合成酶激酶3 β(Glycogen SynthaseKinase-3β，GSK3β)與缺血性神經(jīng)元凋亡的關(guān)系，及亞低溫(mild hypothermia)腦保護(hù)對(duì)缺血性神經(jīng)元凋亡和GSK3β表達(dá)的影響，探討亞低溫對(duì)腦缺血再灌注損傷的可能保護(hù)機(jī)制。 方法：采用四血管阻斷法建立大鼠全腦缺血模型。雄性成年SD大鼠80只，隨機(jī)分為假手術(shù)組，亞低溫組和常溫組，每組設(shè)缺血再灌注后3h、6h、1d、3d 4

2、個(gè)時(shí)間點(diǎn)，亞低溫組和常溫組每一時(shí)間點(diǎn)各8只(n=8)，假手術(shù)組各4只(n=4)。蘇木素.伊紅(HE)染色觀察各時(shí)間點(diǎn)海馬CA1區(qū)細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化， TUNEL法檢測海馬CA1區(qū)神經(jīng)元凋亡，免疫組織化學(xué)染色方法檢測海馬CA1區(qū)GSK3β的表達(dá)。 結(jié)果： 1. HE染色結(jié)果：常溫組和亞低溫組于全腦缺血再灌注后3h和6h，HE染色均未見明顯改變，再灌注1d后，CA1區(qū)出現(xiàn)嚴(yán)重改變，再灌注3d后損傷最嚴(yán)重，出現(xiàn)細(xì)胞數(shù)目減少，細(xì)胞胞

3、體縮小、胞核固縮深染，損傷嚴(yán)重，排列紊亂，核膜不清，核仁消失。而亞低溫組海馬存活的錐體細(xì)胞數(shù)較之常溫組1d、3d時(shí)間點(diǎn)均明顯增加(P<0.05)。 2.TUNEL標(biāo)記：假手術(shù)組各個(gè)時(shí)間點(diǎn)未發(fā)現(xiàn)有陽性細(xì)胞。在海馬CA1區(qū)，常溫組于再灌注6h后出現(xiàn)陽性細(xì)胞，1d后陽性細(xì)胞數(shù)最多，再灌注3d后陽性細(xì)胞數(shù)減少。而亞低溫組在6h點(diǎn)僅有少量表達(dá)，于24h點(diǎn)陽性細(xì)胞數(shù)增多，該兩個(gè)時(shí)間點(diǎn)陽性細(xì)胞數(shù)均較常溫組少(P<0.01)，再灌注3d后陽性細(xì)

4、胞數(shù)最多且高于常溫組(P<0.01)。 3.免疫組化結(jié)果：常溫組于缺血再灌注6h后出現(xiàn)免疫反應(yīng)增強(qiáng)，隨著再灌注時(shí)間的延長，GSK-3β表達(dá)逐漸增高，于1d時(shí)達(dá)到高峰，而后下降；亞低溫組較假手術(shù)組比，于缺血再灌注6h時(shí)間點(diǎn)無明顯免疫反應(yīng)改變，24h時(shí)間點(diǎn)出現(xiàn)免疫表達(dá)增強(qiáng)(P<0.01)，但較常溫組比,GSK-3β的免疫表達(dá)明顯降低(P<0.01)，再灌注3d時(shí)其表達(dá)較常溫組和假手術(shù)組均明顯降低(P<0.01)。 結(jié)論：