復(fù)方銀黃微型灌腸劑抗炎作用機(jī)制研究.pdf

1、目的：研究復(fù)方銀黃微型灌腸劑(YHCE)的體外抗炎效應(yīng)并探討其部分分子作用機(jī)理，為其臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)和理論基礎(chǔ)。 方法：分離、提取并培養(yǎng)大鼠腹腔巨噬細(xì)胞(PMΦ)，給予細(xì)菌脂多糖(LPS)復(fù)制細(xì)胞炎癥模型，鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)學(xué)的改變。采用MTT比色法檢測(cè)YHCE對(duì)PMΦ的生長(zhǎng)活性影響；硝酸還原酶法檢測(cè)YHCE對(duì)脂多糖(LPS)誘導(dǎo)的大鼠腹腔巨噬細(xì)胞分泌一氧化氮(NO)的影響；免疫細(xì)胞化學(xué)法分析誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(iNOS)的表

2、達(dá)及分布變化；RT-PCR檢測(cè)iNOS mRNA表達(dá)及變化。大鼠腹腔巨噬細(xì)胞經(jīng)花生四烯酸(AA)、鈣離子載體A<,23187>孵育后，采用RP-HPLC檢測(cè)白三烯B<,4>(LTB<,4>)、5-羥二十碳四烯酸(5-HETE)含量及變化，以反映5-脂氧合酶(5-LOX)活性變化。 結(jié)果：1．YHCE對(duì)PMΦ的生長(zhǎng)有抑制作用，其半數(shù)抑制率(IC<,50>)為15.56mg/ml；2．LPS刺激組NO含量、iNOS及iNOS mRN

3、A的表達(dá)均顯著增加(P<0.01)，YHCE給藥組及地塞米松干預(yù)組對(duì)LPS引起的NO含量增加、iNOS及iNOS mRNA表達(dá)增加均有明顯抑制作用(P<0.01)；3．LPS刺激組LTB<,4>、5-HETE較正常對(duì)照組含量顯著增加(P<0.0 1)，YHCE給藥組及地塞米松干預(yù)組對(duì)LPS引起的LTB<,4>、5-HETE含量增加均有明顯抑制作用(P<0.01)。 結(jié)論：1．LPS能顯著增加PMΦNO含量、iNOS及iNOS m