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文檔簡介
1、目的:研究復方銀黃微型灌腸劑(YHCE)的體外抗炎效應并探討其部分分子作用機理,為其臨床應用提供實驗依據和理論基礎。 方法:分離、提取并培養(yǎng)大鼠腹腔巨噬細胞(PMΦ),給予細菌脂多糖(LPS)復制細胞炎癥模型,鏡下觀察細胞形態(tài)學的改變。采用MTT比色法檢測YHCE對PMΦ的生長活性影響;硝酸還原酶法檢測YHCE對脂多糖(LPS)誘導的大鼠腹腔巨噬細胞分泌一氧化氮(NO)的影響;免疫細胞化學法分析誘導型一氧化氮合酶(iNOS)的表
2、達及分布變化;RT-PCR檢測iNOS mRNA表達及變化。大鼠腹腔巨噬細胞經花生四烯酸(AA)、鈣離子載體A<,23187>孵育后,采用RP-HPLC檢測白三烯B<,4>(LTB<,4>)、5-羥二十碳四烯酸(5-HETE)含量及變化,以反映5-脂氧合酶(5-LOX)活性變化。 結果:1.YHCE對PMΦ的生長有抑制作用,其半數抑制率(IC<,50>)為15.56mg/ml;2.LPS刺激組NO含量、iNOS及iNOS mRN
3、A的表達均顯著增加(P<0.01),YHCE給藥組及地塞米松干預組對LPS引起的NO含量增加、iNOS及iNOS mRNA表達增加均有明顯抑制作用(P<0.01);3.LPS刺激組LTB<,4>、5-HETE較正常對照組含量顯著增加(P<0.0 1),YHCE給藥組及地塞米松干預組對LPS引起的LTB<,4>、5-HETE含量增加均有明顯抑制作用(P<0.01)。 結論:1.LPS能顯著增加PMΦNO含量、iNOS及iNOS m
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