中醫(yī)大腸濕熱證模型研制及葛根芩連湯對(duì)其影響的研究.pdf

1、目的：研究大腸濕熱證動(dòng)物模型的造模方法，檢測(cè)大腸濕熱證模型鼠血清白介素(Interleukin，IL)-1，-2，-6含量的變化及血清和糞便的輪狀病毒抗原，光、電鏡觀察模型鼠大腸組織病理變化及超微結(jié)構(gòu)改變，應(yīng)用清熱祛濕方藥葛根芩連湯反佐治療，探討大腸濕熱證模型的部分客觀化指標(biāo)。 方法：以清潔級(jí)Wistar大鼠及BLAB/C幼鼠為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，設(shè)立大腸桿菌模型組(Ⅰ組)、輪狀病毒模型組(Ⅱ組)、大腸桿菌+輪狀病毒模型組(Ⅲ組)、幼鼠輪

2、狀病毒模型組(Ⅳ組)、正常對(duì)照組、葛根芩連湯治療組(治療Ⅰ組、Ⅲ組和Ⅴ組)、治療對(duì)照組(Ⅱ組、Ⅳ組和Ⅵ組)，葛根芩連湯治療組和治療對(duì)照組生物因素編排分別對(duì)應(yīng)模型組的Ⅰ組、Ⅱ組和Ⅲ組。應(yīng)用高糖高脂飼料、高溫高濕環(huán)境、輪狀病毒及產(chǎn)毒性大腸桿菌灌胃，綜合制作大腸濕熱證動(dòng)物模型，給予清熱祛濕方藥葛根芩連湯反佐驗(yàn)證治療，應(yīng)用放射免疫法檢測(cè)鼠血清IL-1、IL-2、IL-6含量，ELISA法檢測(cè)血及糞便中的輪狀病毒抗原，HE染色法觀察結(jié)腸、回腸病理

3、改變，透射電鏡觀察超微病理變化。 結(jié)果：大腸濕熱證模型鼠出現(xiàn)發(fā)熱、食欲不振、肛門(mén)紅腫充血、便溏、嗜臥、行動(dòng)呆滯、毛發(fā)蓬松、飲水少等，該模型無(wú)論從發(fā)病條件、病變部位，還是主要癥狀、體征等均近似于中醫(yī)大腸濕熱證型。各造模方法中模型鼠血清IL-1、IL-2含量比正常對(duì)照組顯著升高(P<0.001)，而IL-6組間無(wú)顯著性差別(P=0．053)，EuSA法可檢測(cè)到血清及糞便中的輪狀病毒抗原，結(jié)腸、回腸組織HE染色見(jiàn)黏膜充血、水腫、滲出、

4、淋巴組織增生、大量炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)；電鏡下可見(jiàn)大量桿菌吞噬體及病毒包涵體。葛根芩連湯治療鼠癥狀消失，血清IL-1、IL-2、IL-6含量接近正常，血清及糞便中的輪狀病毒抗原轉(zhuǎn)陰，光、電鏡顯示腸道炎癥反應(yīng)明顯減輕。 結(jié)論：(1)在高糖高脂飼料喂養(yǎng)、輪狀病毒及大腸桿菌灌胃的基礎(chǔ)上，我們首次采用全封閉式高溫倉(cāng)，自動(dòng)調(diào)節(jié)溫度、濕度，成功研制了大腸濕熱證動(dòng)物模型，體現(xiàn)了中醫(yī)大腸濕熱證脾胃內(nèi)傷，再感客邪的“內(nèi)外合邪”致病特點(diǎn)； (2

5、)大腸濕熱證模型鼠血清IL-1、IL-2含量明顯升高(與正常對(duì)照組比較P<0.001)，而血清IL-6升高不顯著(P>0.05)，表明大腸濕熱證模型鼠出現(xiàn)炎癥反應(yīng)，結(jié)腸、回腸的光、電鏡檢查結(jié)果證實(shí)模型鼠結(jié)腸、回腸出現(xiàn)廣泛的炎癥反應(yīng)； (3)運(yùn)用葛根芩連湯對(duì)模型大鼠進(jìn)行反佐驗(yàn)證治療后大腸濕熱證癥狀消失，血清IL-1、IL-2、IL-6含量恢復(fù)正常，血及糞便中輪狀病毒抗原轉(zhuǎn)陰，光、電鏡觀察腸道炎癥改變明顯減輕甚至消失，也證明了模型為