復(fù)方丹參對(duì)犬牙齒移植作用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：研究復(fù)方丹參在犬牙齒自體移植中的作用，探討復(fù)方丹參對(duì)犬移植牙齒牙周組織的影響及可能的機(jī)制。
　　 材料與方法：選用五只成年雄性雜種犬做為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，體重10～12kg，隨機(jī)分為兩組：實(shí)驗(yàn)組3只，做牙齒自體移植并喂服復(fù)方丹參片，一次3片，一日3次；對(duì)照組2只，僅做牙齒自體移植。第一天，每只犬各拔除2牙，互相移植入自體同頜對(duì)側(cè)相應(yīng)的牙槽窩內(nèi)，移植牙齒與鄰牙用結(jié)扎絲∞結(jié)扎，于第10、17、24天同法操作，于第31天處死各犬。五只犬

2、的牙齒移植時(shí)間由此分為4個(gè)時(shí)間段，移植后1周；移植后2周；移植后3周；移植后一月。各犬處死后取其上下頜骨放入中性福爾馬林固定液中固定，固定后以牙為單位取頰舌向牙體-牙周聯(lián)合標(biāo)本，約1.5×1.0×0.5cm，將所取標(biāo)本放入10％EDTA脫鈣液置于微波爐內(nèi)脫鈣，溫度控制在55～65℃之間，脫鈣完成后常規(guī)脫水、透明、浸蠟、包埋、切片。對(duì)每組移植牙的牙體-牙周聯(lián)合標(biāo)本進(jìn)行組織學(xué)HE染色；用powervisionTM(PV)二步法對(duì)其進(jìn)行TGF

3、-β1和PCNA的免疫組化染色，并對(duì)其進(jìn)行平均光密度分析。采用統(tǒng)計(jì)分析軟件SPSS16.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，統(tǒng)計(jì)方法采用重復(fù)測(cè)量數(shù)據(jù)的方差分析，LSD兩兩比較和Pearson相關(guān)性分析，檢驗(yàn)水準(zhǔn)a取0.05。
　　 結(jié)果：(1)組織切片HE染色顯示實(shí)驗(yàn)組骨髓腔中的未分化間充質(zhì)細(xì)胞和骨小梁.邊緣的成骨細(xì)胞數(shù)目多，牙周膜中成牙骨質(zhì)細(xì)胞和成纖維細(xì)胞數(shù)目較多，體積大，核大深染，有較多小血管生成，有明顯新生骨基質(zhì)生成。且在牙齒移植1-4周，

4、移植牙齒牙周組織改建逐漸活躍。對(duì)照組骨髓腔中的未分化間充質(zhì)細(xì)胞數(shù)目和骨小梁邊緣的成骨細(xì)胞數(shù)目相對(duì)較少，體積小，新生骨基質(zhì)形成較少。(2)PCNA免疫組織化學(xué)染色顯示：可見(jiàn)在成纖維細(xì)胞、骨髓的間充質(zhì)細(xì)胞、血管周?chē)拈g充質(zhì)細(xì)胞、血管內(nèi)壁的血細(xì)胞及骨小梁邊緣的成骨細(xì)胞都有陽(yáng)性表達(dá)，骨基質(zhì)中的骨細(xì)胞偶有陽(yáng)性表達(dá)。實(shí)驗(yàn)組的陽(yáng)性表達(dá)明顯高于對(duì)照組，陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)量多，體積大，核大深染，兩組比較存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.001)。在牙齒移植術(shù)后1-4周的時(shí)

5、間里隨著時(shí)間的增加兩組的陽(yáng)性表達(dá)均有增加(P<0.001)，實(shí)驗(yàn)組在第2周、1月時(shí)移植牙齒牙周組織中的平均PCNA水平高于第1周和第3周時(shí)的平均PCNA水平，在一月時(shí)的平均PCNA水平最高。(3)TGF-β1免疫組織化學(xué)染色顯示：在骨髓的間充質(zhì)細(xì)胞、骨小梁邊緣的成骨細(xì)胞、血管周?chē)拈g充質(zhì)細(xì)胞、血管內(nèi)壁的紅細(xì)胞的胞漿都有陽(yáng)性表達(dá)，在成熟的骨細(xì)胞中未見(jiàn)有表達(dá)，在牙周膜的成纖維細(xì)胞的胞漿及細(xì)胞外基質(zhì)中也有陽(yáng)性表達(dá)。實(shí)驗(yàn)組的陽(yáng)性表達(dá)明顯高于對(duì)照