家蠅細胞色素P450介導抗性機制的研究.pdf

1、細胞色素P450單加氧酶系是一類廣泛分布于生物有機體中的重要酶系，它能夠代謝多種內(nèi)源性物質(zhì)和外源性物質(zhì)，因其生物學的重要性，一直是生物學領(lǐng)域研究的一個重要對象。家蠅(Eusca domestica)是一種在世界范圍內(nèi)普遍發(fā)生的重要的公共衛(wèi)生害蟲，可以傳播60多種人和動物的腸道疾病。有效地消滅家蠅，對于控制許多重要疾病的傳播，保證人類健康具有重要意義。為深入研究家蠅細胞色素P450的抗性機制，我們就家蠅細胞色素P450方面的工作開展了研究

2、，主要研究結(jié)果如下： 利用試驗室汰選的擬除蟲菊酯類抗性品系家蠅(ISO、BSR)用點滴法測定了抗性家蠅對增效劑的增效作用和對幾種殺蟲劑的交互抗性作用，結(jié)果表明：ISO的抗性倍數(shù)為492，增效倍數(shù)為30；BSR的抗性倍數(shù)為567，增效倍數(shù)為64倍。二氯苯醚菊酯和溴氰菊酯之間存在較高程度的交互抗藥性；擬除蟲菊酯抗性較高的家蠅對作用機制不同的新農(nóng)藥(多殺菌素、氟蟲腈)表現(xiàn)較低程度的交互抗性。 測定了家蠅細胞色素P450含量和b

3、<,5>含量。結(jié)果顯示抗性品系的P450含量和b<,5>含量都要高于敏感品系；選擇了細胞色素P450的兩種目標底物(對硝基苯甲醚、甲氧基試鹵靈)。分別對其進行了活性測定，結(jié)果表明P450對兩種底物都有活性，且抗性家蠅的酶活性要高于敏感家蠅。 根據(jù)細胞色素P450血紅素結(jié)合區(qū)的保守序列，設(shè)計了8條P450特異性引物，應(yīng)用基于mRNA差異顯示(mRNA differential display RT-PCR)的基因分離技術(shù)，采用mR